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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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clf0803

银虫 (正式写手)

[交流] 同时双酶切还是分别单酶切?

我正准备做酶切,我的两个酶分别是NdeI和HindIII,这两个酶的反应条件都是37度,但最佳buffer不一样,请问我该同时切还是分步切呢?有经验的给各建议,谢谢!
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biocore


reasonspare(金币+1,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.谢谢交流
每个公司,都有一个,该酶在不同buffer中的活性表。
如果两个酶在该buffer中,活性大于75%,基本上,就可以双酶切了。

双酶切,节省时间,出错,也容易找到错在那里。
2楼2008-03-08 21:16:33
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sxp19840810

木虫 (小有名气)


reasonspare(金币+1,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.兄弟很热心. 新虫鼓励奖2个
不是有通用buffer吗  
我用Hind3和Pst1双酶切时,就是用的buffer-otang
好象是的,仅供参考啊
3楼2008-03-08 21:18:58
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)


reasonspare(金币+1,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.谢谢交流
双酶切没问题,NdeI和HindIII在2*BufferY+/Tangotm中的活性都在50%以上。
4楼2008-03-08 21:22:15
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hotdunk

金虫 (正式写手)


reasonspare(金币+1,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.谢谢交流
温度一样的话双酶切比较省时间啦,不一定非要同时都在最佳活性时才双酶切,可以试试的~
你用的什么公司的酶?如果是TAKALA的应该有双酶切表可以查得用什么Buffer比较好的~ (你那两个是1*K Buffer)
爱情来得快去得也快,只有猪肉卷是永恒的!
5楼2008-03-08 21:24:09
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wangjun0457

银虫 (小有名气)

应该可以切
6楼2008-03-09 09:22:31
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bijiaoyingyang

金虫 (小有名气)

应该可以的。

他们的工作环境温度,时间,Buffer一样的话,理论上可以。我只这样做过一次,效果也可以。
7楼2008-03-09 14:16:06
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dragon1971

木虫 (正式写手)

TAKARA的是可以双酶切的,Buffer需要自己查一下,
8楼2008-03-09 14:28:20
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mimisikai

金虫 (小有名气)

可以同时双酶切 通用buffer是k buffer
9楼2008-03-09 18:03:54
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