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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 同时双酶切还是分别单酶切？
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clf0803

银虫 (正式写手)

[交流] 同时双酶切还是分别单酶切？

我正准备做酶切，我的两个酶分别是NdeI和HindIII，这两个酶的反应条件都是37度，但最佳buffer不一样，请问我该同时切还是分步切呢？有经验的给各建议，谢谢！
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1楼 2008-03-08 19:17:22
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biocore

★
reasonspare(金币+1,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.谢谢交流
每个公司，都有一个，该酶在不同buffer中的活性表。
如果两个酶在该buffer中，活性大于75%，基本上，就可以双酶切了。

双酶切，节省时间，出错，也容易找到错在那里。
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2楼2008-03-08 21:16:33
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sxp19840810

木虫 (小有名气)
★
reasonspare(金币+1,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.兄弟很热心. 新虫鼓励奖2个
不是有通用buffer吗  
我用Hind3和Pst1双酶切时，就是用的buffer-otang
好象是的，仅供参考啊
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3楼2008-03-08 21:18:58
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★
reasonspare(金币+1,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.谢谢交流
双酶切没问题，NdeI和HindIII在2*BufferY+/Tangotm中的活性都在50%以上。
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4楼2008-03-08 21:22:15
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hotdunk

金虫 (正式写手)
★
reasonspare(金币+1,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.谢谢交流
温度一样的话双酶切比较省时间啦，不一定非要同时都在最佳活性时才双酶切，可以试试的~
你用的什么公司的酶？如果是TAKALA的应该有双酶切表可以查得用什么Buffer比较好的~ （你那两个是1*K Buffer）
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爱情来得快去得也快，只有猪肉卷是永恒的！
5楼2008-03-08 21:24:09
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wangjun0457

银虫 (小有名气)
应该可以切
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6楼2008-03-09 09:22:31
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bijiaoyingyang

金虫 (小有名气)

应该可以的。

他们的工作环境温度，时间，Buffer一样的话，理论上可以。我只这样做过一次，效果也可以。
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7楼2008-03-09 14:16:06
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dragon1971

木虫 (正式写手)
TAKARA的是可以双酶切的,Buffer需要自己查一下,
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8楼2008-03-09 14:28:20
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mimisikai

金虫 (小有名气)
可以同时双酶切 通用buffer是k buffer
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9楼2008-03-09 18:03:54
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