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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求祝各位大神哈，DNA 片段放置时间过长是否会影响连接效率？？？
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ottoKING

新虫 (小有名气)

[求助] 求祝各位大神哈，DNA 片段放置时间过长是否会影响连接效率？？？ 已有4人参与

各位论坛大神，本人准备guse载体构建，DNA片段是几个月前扩出来的，一直放在-20冰箱里面。现在准备t4连接，不知道会不会影响连接效率
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1楼 2014-04-27 08:37:42
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
放心的去做吧，没有问题。

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2014-04-27 08:49:51
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yb19841014

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-04-28 10:38:12
不知道  但是我以前做T4连接的时候 片段 和载体  如果放久了  效率就会明显降低  而且最好不要反复冻融  希望你的实验能成功
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3楼2014-04-27 21:52:55
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zep616745243

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
曾连过4度放6个月的片段，是T载体，效率还不错，酶切正确，但没有测序
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只有不断地失败才会成功
4楼2014-04-28 10:38:44
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lishuiqing

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可以的，你放-20度 只要不要反复冻融 就没问题，放4摄氏度也行。
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5楼2014-05-08 10:10:10
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