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867575969

至尊木虫 (著名写手)

One Piece

[求助] ISSR-PCR分析时每一种不同材料都得进行体系优化吗,到底和哪些因素有关? 已有3人参与

求助各位大虾,最近看PCR体系建立和优化论文,产生了一些疑问:是不是每一种植物(材料)进行ISSR-PCR分析时的体系都不一样,即使同一科属的?如果是,那为什么会不一样,难道只是基因组DNA不一样造成的?是不是对同一材料,当使用不同引物时,可以用相同的体系,只是TM值改下就行了?希望不吝解答,谢谢!!
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有些东西因为得不到而变得美好,有些东西因为拥有而变得弥足珍贵!
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gdmchql

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

ISSR是一种基于PCR的分析技术,受到DNA模板、引物、酶用量以及退火温度,甚至实验室环境条件等因素的影响,因此一般来说不同物种都要建立和优化PCR体系。因为它们基因组序列不同。当然,优化的PCR体系也是相对稳定,对某个样品可能仍要适当调整
我当时在做的时候,对于同一样品,使用不同引物时,只是改变了引物的Tm值,其他因素都是基本相同的。
33楼2014-04-30 15:22:21
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867575969(金币+1): 谢谢参与
4楼2014-04-25 18:40:09
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7楼2014-04-25 19:01:23
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