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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

[求助] 核苷酸质谱已有1人参与

搞生物的,理化基础太差,问几个问题:
Nucleosides were separated by reverse phase ultra-performance liquid chromatography on a C18 column with online mass spectrometry detection using Agilent 6410 QQQ triple-quadruple LC mass spectrometer in positive electrospray ionization mode.
The nucleosides were quantified using the nucleoside to base ion mass transitions of  
282.1/ 150.1 (m6A), 268.1/136.1 (A), 244.1/112.1 (C), 284.1/152.1 (G), and 245.1/113.1 (U).
Quantification was performed by comparison with the standard curve obtained from pure nucleoside standards running at the same batch of samples. The ratio of m6A to A was calculated based on the calculated concentrations

这段话大概表面意思我懂,一些具体问题

1,反向HPLC是不是就可以把各种不同碱基的核苷酸分开?比如这里列的m6A,A,C,G,U?

2,positive electrospray ionization mode这是个什么意思,通俗易懂一点。

3,质谱对同分异构体怎么区分?比如m6A,和m1A。

4,是不是理论上质谱可以检测所有的未知物质?比如我的样品中,要是还有不是这5种的其他类型核苷酸,我能知道他是什么吗?

比如以下这些类型的分子:

核苷酸质谱
1.jpg


核苷酸质谱-1
2.jpg


核苷酸质谱-2
3.jpg


核苷酸质谱-3
4.jpg
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chyll9999

木虫 (小有名气)

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感谢参与,应助指数 +1
biostar2009: 金币+20, ★★★很有帮助, 有时候看见会出现[M+H]+,[M+Na]+,有时候又只看见只有[M+H]+,这是跟ESI正离子模式时加的溶剂有关么? 2014-04-26 19:11:17
biostar2009: 金币+30, ★★★很有帮助 2014-04-29 19:07:55
LC/MS用ESI离子源,不会产生和EI这么小的碎片离子峰,正离子模式只产生准分离子峰,也就是[M+H]+、【[M+Na]+等,想要知道碎片的,只能找到母离子,做二级或多级质谱
forever
8楼2014-04-26 10:42:29
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