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songfei1989

金虫 (正式写手)

[求助] 关于反向ODS MCI的问题 大家发表一下意见，小弟跪谢。。。 已有1人参与

1 ODS MCI 在每一次上样的时候还要重新装柱吗  因为每一次处理的样品量不一样，样品少的时候就看不到了，样品填料比是怎样的。
2 每次接通一个比例组分的时候接几瓶，水特别难处理，大家有没有好的处理方法，怎样将水旋出去的（伤泵）。
3 在上样之前摸条件假如说在50%甲醇水的时候Merck反向板可以分开，是不是就在这个条件接柱子的时候用好多瓶子接，用MerckC18反向板摸得条件准确吗？
4 ODS MCI都是装在开放柱里的，与HPLC有什么区别，这种情况用钢瓶加压，多少Mpa合适？
望各位大侠不吝赐教，金币还可以追加。。。全部奉上，以及一些反向柱使用的注意事项，也可以写上，小弟在此跪谢啦
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1楼 2014-04-23 22:27:53
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victorcbs

新虫 (初入文坛)
1，建议每次都重装，根据你的样品量来装相应的填料，一般比例50~100:1吧，看你的分离度怎么样分离度大可以上样量大一点。
2，ODS建议梯度洗脱，如果等度的话建议0.5个柱体积一瓶。视具体情况作调整，可以接的更细一点。至于水的问题我们都用隔膜泵，能到很低的真空度，把水旋出去没问题。
3，Merck板的分离效果很好，一般在那上边能分开在一般地中压或常压柱上比较难分开。还得用制备的HPLC。
4，区别就是分离效果的差别，HPLC 5 μm，压力大，用液相泵泵流动相，一般的ODS是40μm，用中压泵泵流动相，分离度稍差一点。MCI想树脂一样，一般常压走。不建议用钢瓶加压。
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5楼2014-05-05 10:28:02
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Cpuli87

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
songfei1989: 金币+10, ★有帮助 2014-06-23 11:38:05
1.若是你的样品很纯的话，你上反相或者MCI只是简单的处理下色素什么的，那么建议你拆卸下来洗洗干净，重装；一般性的上反相或者MCI柱，在上样前认真的用甲醇或乙醇，甚至丙酮冲洗至回收基本无物质出来就可以了。
2.少量的上样，可以用甲醇或乙醇溶解，可以向其中滴少量的水，根据样品而定。
3.用MERK板摸索后，上开放柱最好浓度缩减5-10%。
4.与HPLC肯定是有区别的，一个算高压，一个算中低压的，分离度就不一样的，而且用的填料，HPLC一般是5微米的，而ODS最常见的是40-60微米的。我们一般冲洗反相是用加压的，就是使用鱼尾泵，还有就是减压，一般也就这两种方法，用钢瓶加压一般不推荐啊 ，有危险的！减压最安全。
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2楼2014-04-24 08:53:44
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songfei1989

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Cpuli87 at 2014-04-24 08:53:44
1.若是你的样品很纯的话，你上反相或者MCI只是简单的处理下色素什么的，那么建议你拆卸下来洗洗干净，重装；一般性的上反相或者MCI柱，在上样前认真的用甲醇或乙醇，甚至丙酮冲洗至回收基本无物质出来就可以了。
2 ...

有什么好的除去水的办法吗，就是比如说 我用Merck板50%能跑上去，那么我就在40%的梯度上用好多瓶子接吗？？还是每个梯度都得用好多瓶子接？
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3楼2014-04-24 13:04:16
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Cpuli87

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
songfei1989: 金币+5, ★★★很有帮助, 有没有想干MCI的帖子 或者文献推荐 2014-06-23 11:39:43
引用回帖:
3楼: Originally posted by songfei1989 at 2014-04-24 13:04:16
有什么好的除去水的办法吗，就是比如说 我用Merck板50%能跑上去，那么我就在40%的梯度上用好多瓶子接吗？？还是每个梯度都得用好多瓶子接？...

你可以大概的按柱体积接吧！除水就是真空回收啊，若是含水很多加乙醇带！
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4楼2014-04-24 13:22:09
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