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铁虫 (初入文坛)

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[交流] D-Hanks 中酚红的作用，它的PH值是多少

1、酚红(Phenolsulfonphthalein )别名苯酚磺酞是一种常用的酸碱指示剂，在pH为6.6—8.0之间显示橙色，pH低于6.6呈现黄色，pH高于8.4呈现红色。
2、你应该用PH试纸试一下真实的PH有没有变化，如果变了可以加碳酸氢钠。
3、我们配D-HANKS从来不加酚红。
4、加不加都可以，据说加葡萄糖可以营养一下细胞，但是加葡萄糖后不能高压灭菌，不能超过110度，8磅超过后高压会羟化，液体会变成淡黄色。

5、其中磷酸二氢钠是否带结晶水，可以根据总共需要多少磷酸二氢钠来换算。
Na2HPO3的分子量是126
Na2HPO3·12H2O的分子量是126+216=342
Na2HPO3·12H2O中含Na2HPO3为126/342
如果将Na2HPO3·12H2O换算成Na2HPO3用乘法.例如34.2克Na2HPO3·12H2O中含有Na2HPO3多少克？
34.2×126/342=12.6克
如果将Na2HPO3换算成Na2HPO3·12H2O用除法。例如题目中3.55g的无水磷酸氢二钠换算成十二水合的磷酸氢二钠的质量是多少克?
3.55÷126/342=3.55×342/126=9.636克

Hanks液可以维系细胞正常渗透压与pH，本文主要记录了动物细胞培养中Hanks液、D-Hanks液和消化液(胰酶液)的配制方法及其注意事项。
hanks液可以维系细胞正常渗透压与pH，本文主要记录了动物细胞培养中Hanks液、D-Hanks液和消化液(胰酶液)的配制方法及其注意事项。
动物细胞培养: hanks、D-Hanks液和消化液(胰酶液)的配制
实验目的：熟练掌握Hanks、D-Hanks液等平衡盐溶液的配制，了解消化液(胰酶液)的配制方法。
实验原理：Hanks液是常见的平衡盐溶液(BSS)之一。D-Hanks液则是无钙镁离子的Hanks液。BSS与细胞生长状态下的pH值、渗透压及无菌状态一致，且配方简单，是组织培养基本用液，常用于配制培养基及其他用液，或洗细胞等，细胞在BSS中可生存几个小时。胰蛋白酶(胰酸)溶液是一种常用的细胞消化液，原代培养时用于处理组织块，使细胞分离下来。传代时用胰蛋白酶使培养细胞离开所贴附的培养瓶表面，并分散成单个细胞。胰蛋白酶主要采自牛或猪的胰脏，呈白色粉末状，易潮解，应在低温干燥处保存。胰酶的活力常用一份胰酶解离酪蛋白的份数表示，常用胰酶活力为1：125或1：250。本实验室一般用1：250(GRC公司生产)。胰蛋白酶对细胞的分离效果与细胞的类型、特性和瓶壁表面特性有关。一般来说浓度大、温度高(勿高于37℃)、作用时间长，则对细胞分离能力大。但超过一定程度会损伤细胞，导致细胞传代后不能贴壁或死亡。胰酶在pH 8.0、37℃时消化能力最强。溶液中的Ca2+、Mg2+和血清会降低胰酶活力，所以配制胰酶时须用无Ca2+、Mg2+的D-Hanks液。当消化结束时，可加入少量血清或含血清的培养基以终止胰酶作用。细胞传代使用的胰酶浓度是0.25%或0.2%。用于原代细胞培养消化组织块则为0.1%或0.125%。
实验材料与用品
***材料：3 000 mL锥形瓶，25 mL、50 mL试剂瓶，500 mL输液瓶，螺口盖，翻帽塞，pH试纸，孔径0.22μm的微孔滤膜。
***药品：NaCl，Na2HP04，KH2P04，KCl，酚红，NaHC03，胰蛋白酶干粉，0.02%EDTA，CaCl2，D-葡萄糖，MgCh·6H20，MgS04·7H20，酚红(0.1%)(配法：称酚红2 g，置于研磨器中，先用数滴5.6%的NaHCO3溶液溶解并研磨，再加进该5.6%NaHC03溶液使最终体积为100 mL。瓶装保存，备用)。
***仪器(请参看仪器图库)：抽滤泵1套，过滤器1套，高压灭菌锅，量筒，磁力搅拌器，研磨器。
实验步骤
(一)配制D-Hanks液
1.按表2—3—5称取D-Hanks试剂。
2.依次加入上述试剂至800 mL蒸馏水中，溶解后定容至1 1000 mL。 3.高压灭菌，10磅10 min。

(二)配制Hanks液
1.按表2—3—5称取Hanks试剂。
2.配制Hanks时，需将CaCl2另溶解于100 mL的蒸馏水中。
3.依次加入上述试剂至700 mL蒸溜水中，溶解后再与CaCl2溶液一起定容至1 000 mL。
4.10磅，10 min高压灭菌。
(三)配制胰蛋白酶消化液
1.D.Hanks液高压灭菌之后，晾至室温，4℃保存备用。

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