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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助：垂直电泳怎么跑不动
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hquqh1

[交流] 求助：垂直电泳怎么跑不动

各位高手：  
    我在做蛋白的SDS-PAGE过程中，样品总在浓缩胶中，不往下跑，电泳液是新配的，来来回回做了很多次，胶应该没有问题，为什么总是不往下跑，这和样品中蛋白浓度较大有关系吗？？
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1楼 2008-03-05 23:21:21
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jfchang

新虫 (初入文坛)
重新配凝胶缓冲液，离子浓度或PH值不对。
一般分离胶缓冲液浓度1.5M,pH8.8（4倍）
浓缩胶缓冲液浓度0.5M，pH6.8（4倍）
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2楼2008-03-06 11:13:29
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zhjcao

木虫 (小有名气)
与样品浓度有关系，当样品浓度过大时会出现这样问题。可稀释5-10倍试试
另，你的marker跑的怎么样？
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3楼2008-03-06 12:19:41
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dreamsail

银虫 (正式写手)
俺以前跑的时候也出现跑不动的问题,而且电流老是生不上去
后来发现是封口的琼脂糖没有用缓冲液,不导电.
好运~
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4楼2008-03-06 16:44:26
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puma2003

铁杆木虫 (著名写手)
怎么个不往下跑？不出点样孔吗？
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5楼2008-03-06 17:25:09
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yougke

铜虫 (小有名气)
可能是样品浓度过大，菌液的话，可以稀释－沸水煮后再离心取上清电泳
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6楼2008-03-07 01:14:43
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