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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 实验室分析、仪器 » 层析柱分离纯化，懂得亲们来帮帮忙啊
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ywlzwd

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
18楼: Originally posted by 李畅0527 at 2014-04-25 11:03:56
恩恩，谢谢，挺有用的，我再做下试试。请问你会用蛋白质纯化仪么？...

不好意思，蛋白质纯化仪不会用。
纯化蛋白还可以考虑先粗提，再使用分子筛与离子交换交替使用，拿到的蛋白纯度还是很高的。不过过柱子，确实很耗神啊！楼主加油。
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静下来，沉下去，将学到更多！
21楼2014-04-26 01:06:04
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飘渺尘埃

木虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by 李畅0527 at 2014-04-25 11:03:56
恩恩，谢谢，挺有用的，我再做下试试。请问你会用蛋白质纯化仪么？...

如果有的话用这个仪器当然好了，自动化，但是之前最好还是先初步处理一下样品比较好
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成功需要的条件很多，你我只需在一个条件下努力前行
22楼2014-04-26 09:06:18
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//安生

金虫 (知名作家)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 李畅0527 at 2014-04-25 10:45:19
我也不知道，就是乳铁蛋白水解物，应该1000到8000范围挺广的。可能是柱子没装好吧。对了，请问你会用蛋白质纯化仪么？那什么AKTA。...

说实话，，，我也想知道怎么使用，我实验台旁边就有这么个仪器，从来么见谁使用过啊，，，
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日久不一定生情，但必定见人心。
23楼2014-04-26 09:35:18
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李畅0527

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
23楼: Originally posted by //安生 at 2014-04-26 09:35:18
说实话，，，我也想知道怎么使用，我实验台旁边就有这么个仪器，从来么见谁使用过啊，，，...

我最近在用这个仪器，把柱子跟纯化仪连上，也不知道不出峰是不是我仪器设置的问题，唉。
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24楼2014-04-26 16:20:10
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李畅0527

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
21楼: Originally posted by ywlzwd at 2014-04-26 01:06:04
不好意思，蛋白质纯化仪不会用。
纯化蛋白还可以考虑先粗提，再使用分子筛与离子交换交替使用，拿到的蛋白纯度还是很高的。不过过柱子，确实很耗神啊！楼主加油。...

恩恩，谢谢，加油加油，想不加油也不行啊，唉。
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25楼2014-04-26 16:21:44
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李畅0527

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2014-04-23 01:16:53
能不能上图？

好的
层析柱分离纯化，懂得亲们来帮帮忙啊
20140405_183313.jpg
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26楼2014-04-26 16:28:29
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★
李畅0527: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-04-27 19:33:54
我的本意是想看看是不是你的蛋白质太多，导致分不开，所以想看看你的Y轴数值大不大，但现在你没给我看。从这个图来看，可能主要水解成3个长度的肽段，所以如果你的Y轴数值很大，你就试一下减少样品。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
27楼2014-04-26 19:55:00
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SPMMP

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

1，由于目标产物是小肽，检测波长应是210-214 nm而不是280 nm。
2，有条件的话，建议采用Superdex peptide柱，效果好。
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28楼2014-04-27 08:05:49
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