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李畅0527

铁虫 (初入文坛)

[求助] 层析柱分离纯化,懂得亲们来帮帮忙啊 已有7人参与

我将蛋白水解后应该有很多不同分子量的肽,经分子筛分离应该有很多峰,可是为什么只出了一个穿透峰呢,明白的请帮我分析一下。我用的填料是葡聚糖凝胶G25,柱子是1.6*40cm的。上样浓度是50mg/ml,不出峰是不是跟浓度有关系啊?
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李畅0527

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by zhaoyingqing at 2014-04-22 15:19:30
我感觉 不应该是柱子的问题, 有可能是浓度的问题,另外一个就是你样品处理 可能就是一个峰,要不你可以做一下粗分离

我的样品是蛋白质水解物,应该是很多不同分子量的多肽,不可能就一个峰啊,凝胶色谱就是我的粗分,还有什么办法能检测一下我的样品组成么?
9楼2014-04-22 15:50:35
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查看全部 28 个回答

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

你应该可以画一条曲线,横轴是收集管,纵轴是A280.
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2014-04-19 23:14:09
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1034181008

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
1、有可能还没分开呢,这么短的柱子,要是你自己填充的,柱效应该没那么高。2、浓度可能太低,检测不出。个人拙见,你再试试。
3楼2014-04-19 23:22:30
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//安生

金虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
换个长些的柱子吧,个人认为与柱子长度有关,本人正在进行这方面的纯化实验,80cm的柱子,装了将近次柱子,只有1次最满意,,,不是人为可以控制的啊,努力装的一样,可峰型还是还是有差异的加油
日久不一定生情,但必定见人心。
4楼2014-04-22 08:44:06
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