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请问做蛋白水解用OPA还是茚三酮好呢 已有1人参与
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| 用OPA方法，读书不稳定，很头疼，请高人指点！ |
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xiaoamuchong
专家顾问 (职业作家)
科研工作者
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【答案】应助回帖
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应用茚三酮方法来侧定水解物的水解度是一种比较古老的方法。茚三酮和α一氨基产生蓝色化合物。这种方法是非常灵敏的, 但是一般配制成的显色剂的稳定性较差(试剂对氧非常敏感) , 利用AOAC(1980版)中采用的显色剂, 则可弥补这个不足, 显色剂在冰箱中可以保存一周。氨基的相互作用和空白具有很高的值, 并且由于需要形成发色基团, 分析时加热和冷却都需要很长时间。郭兴凤对此方法进行了改进, 利用待水解原料的完全水解液作为标准, 消除了由于不同氨基酸与茚三酮结合产物的呈色度不同对测定结果造成的误差。 郭兴凤. 蛋白质水解度的测定[J]. 中国油脂,200 ,25(6)，176 一177 . OPA方法是一个快速而简单的测定蛋白质水解物水解度的方法, 不需要很长时间的反应。OPA测定水解度依靠水解的底物,在OPA和半胧氨酸之间发生一个弱且不稳定的反应, 这种方法不适合用于半胧氨酸丰富的底物中, 且脯氨酸和OPA不反应。 |
2楼2014-04-19 16:27:47
