6楼: Originally posted by 周志惠 at 2014-04-19 08:16:13
大肠摇菌3小时确实不会有菌出，你这是连T载体，只要片段亮度不是很淡，应该不是问题，片段是用rTaq酶P的么？白色菌落也不一定就是阳性克隆

7楼: Originally posted by zhangtao110 at 2014-04-19 09:05:33
用soc，营养高些，利于细胞壁的快速生成

10楼: Originally posted by 银小耳 at 2014-04-20 21:43:36
我离心了下～12000rmp,1.5min ,离心管底部几乎没有菌,好像根本没有长起来，难道是我T载体没连上，之前在平板上长的是杂菌？...

13楼: Originally posted by lairongpeng at 2014-04-20 23:55:52
平板有放amp抗生素吧？摇菌的时候放的也是amp吧？如果是，那就过夜摇菌一下，第二天应该很浑浊
...

9楼: Originally posted by 银小耳 at 2014-04-20 21:41:11
第二个的1是为了验证第一个的5是抗性单克隆～我也怀疑固体平板中氨苄失活了，有验证方法吗？？...

15楼: Originally posted by kueradi at 2014-04-21 12:23:22
液体培养基涨不起来，说明你的氨苄好着。那固体板子做的时候，可以一次少到点板子，等到培养液在手背上温不烫的时候再加氨苄，我每次到10个，最后一个刚倒下去刚好就凝固了。再试试吧。得一个一个因素慢慢排除。...