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elvissong铁虫 (初入文坛)
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[求助]
可否用离心机将粪便中杂质和细菌粗分离？ 已有1人参与
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我们实验室需要使用多重PCR的方法检测粪便中细菌（空肠弯曲菌）的存在率，因为粪便中杂质比较多，可否通过水煮法提取模板？具体有什么条件吗？ 因为导师说粪便中杂质多，直接水煮的话模板质量无法保证，是这样吗？ 如果杂质确实对模板质量造成影响，可否通过离心、过滤等方法去掉大多数杂质？ 已知空肠弯曲菌大小约0.2-0.8umX0.2-0.8umX4um长。 细菌菌体一般沉降系数是多少呢？ 我一般10000rpm转1min菌体就都结结实实的沉底了，（1.5ml）EP管。 我的思路是知道粪便杂质的沉降系数，和细菌的沉降系数，选择一个离心速度，杂质沉底，细菌留在溶液里面。 求各位大侠帮忙。 ================ 另外还想问个问题 我们实验室涉及用纸片扩散法测空肠弯曲菌趋化性，具体过程如下： 1. 采用基于脱氧胆酸钠硬琼脂法(DOC．HAP)的空肠弯曲菌体外趋化模型 刮取胰酶大豆肉汤血琼脂平板上新鲜培养的野生型空肠弯曲菌NCTClll68株或 cheA一突变株菌苔置于10 ml 0．01 mol／L PBS(pH7．4)中，混匀后5000 r／min离心30 min，取细菌悬沉淀用PBS重、离心3次，最后用PBS将细菌浓度调整至5×108 CFU／ml。用上述PBS配制0．8％琼脂(Sigma)，细菌悬液37℃水浴预热10rain后与等体积0．8％琼脂(42℃)混合，倾注平板。将0．2mol／L DOC(Sigma)滤纸片(8 mm)紧贴于平板表面。平板置于5％02、10％C02、85％N2气体条件下 37℃孵育3 h后观察结果，滤纸片周围出现圆形乳白色细菌聚集环判为趋化阳性。 请问一下这个8mm的滤纸片怎么制作啊 有要求么？怎么将滤纸片的DOC浓度调到0.2mol/L啊？ 另外琼脂可以换成MH培养基么，貌似MH培养基里面加了一些营养因子，还可以测趋化性么？ |
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