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teresahu

铜虫 (小有名气)

[求助] 急急急!中药药效物质单体成分的药效协同作用研究方法都有什么呢?实验该如何设计??

前期的实验找到了中药注射液的药效物质有5个(由于5个不好研究清楚,所以最后缩小到考察2个药效物质.....),查阅文献发现,想将相互作用(相加、协同、拮抗)量化的方法有:1、等效线分析法2、中效分析法。我的实验想采用这两种方法其中一种均可,问题如下:
1、这种中药注射液是治疗心肌梗死疾病的,心梗的经典药效指标(体内实验)有:心梗面积、心肌酶(CK-MB, LDH,cTnI等);在细胞实验上,可以MTT检测细胞存活率,剩下的还有很多分子通路蛋白,这类实验大家有做过的没?是如何设计的呢?
2、我的思路:在大鼠体内分组分剂量(A药组、B药组、AB药组,每组给五个不同剂量)给药后,测定心梗面积,找到A药的ED50,B药的ED50,AB合用的ED50值作等效线图,找到是协同,还是相加还是拮抗;然后继续在细胞水平上验证药效作用:也是给不同剂量的单药和合并用药,以MTT做细胞存活率考察,方法同上得出相互作用的情况,下面,就想进一步通过分子通路来研究为什么会产生这些协同、相加、拮抗作用,一直没有想出什么合适的思路,难道真的是做western-blot 跑蛋白,然后将蛋白灰度定量,继续用上述方法做出相互作用结果么?
      查了很多文献,木有看到一篇和我的实验相关的,基本都集中在两类药的研究上:1、镇静镇痛药 (临床上合并用药较多,故研究的也很多)2、抗癌细胞药。他们都有共同的特点是:药效指标单一,是这类药效的金标准;有固定研究模式,基本往里套就成了。
      小女真的十分纠结啊,不知道自己那样想可以不?周围没人能问的,只有求助于虫友了,希望大家能够给我些好的建议~~~~~
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