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笑笑2014

新虫 (初入文坛)

[交流] cas9/talen基因敲除

完美基因靶向操作: 识别特异DNA序列的蛋白+操作DNA的酶
talen技术原理:TALEN两部分组成:识别特异DNA序列的TALE和内切酶FOKI 。细胞内基因组DNA被TALEN剪切后,诱发DNA损伤修复机制。细胞可以通过NHEJ(Non-homologous End Joining)修复DNA,在此修过程中或多或少地删除或插入了一定数目的碱基,造成移码,形成目标基因敲除突变体。

TALEN敲除基因的效率大约为20%,从1%-30%。 最好的TALEN达50%

cas9技术原理:(CRISPR)/Cas9是细菌和古细菌一种不断进化适应的免疫防御机制。CRISPR/Cas9利用一段小 RNA 来识别并进行有效的靶向DNA剪切。
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