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笑语盈盈

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】细胞慢慢变成碎渣是什么原因 已有3人参与

最近几周共进行六次细胞复苏,第一二次细胞复苏六小时后部分贴壁,形态较好,二十小时后全部分化;后面四次细胞复苏六小时后部分贴壁,形态较好,第二三天细胞大部分漂浮,形态较好,但细胞碎渣很多,慢慢的会全部变成碎渣。

【求助/交流】细胞慢慢变成碎渣是什么原因
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【求助/交流】细胞慢慢变成碎渣是什么原因-1
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已支

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你这是培养多久的细胞?在多少倍镜下观察的?觉得应该是你细胞冻存时数量太少了~我一般25cm2细胞就接两管,每管一毫升多点,活性至少95%-98%。我复苏完24h后观察,细胞如果贴的好的话就换液,不用PBS冲洗,次日传代;贴的不好的话就多长一天,再观察细胞状态,不换液第三天传代。都是看细胞状态,时间没固定的~你后面四次复苏很好,我建议哈第二天换液试试,然后晚上或者第二天一传一,吹打一定要温柔要轻,机械损伤很大!这个细胞接的太少还长不起来~前期就接多一点~个人愚见!
2楼2014-04-11 18:56:44
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3楼2014-04-11 21:37:36
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pumaatlarge

禁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

4楼2014-04-11 22:53:40
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笑语盈盈

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 已支 at 2014-04-11 18:56:44
你这是培养多久的细胞?在多少倍镜下观察的?觉得应该是你细胞冻存时数量太少了~我一般25cm2细胞就接两管,每管一毫升多点,活性至少95%-98%。我复苏完24h后观察,细胞如果贴的好的话就换液,不用PBS冲洗,次日传代 ...

即使能复苏,细胞状态也不好,稍微被刺激就漂了。

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-04-12 09:12:25
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笑语盈盈

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by pumaatlarge at 2014-04-11 22:53:40
最近几周共进行六次细胞复苏,第一二次细胞复苏六小时后部分贴壁,形态较好,二十小时后全部分化;后面四次细胞复苏六小时后部分贴壁,形态较好,第二三天细胞大部分漂浮,形态较好,但细胞碎渣很多,慢慢的会全部变 ...

有换液这个是分瓶之后的,一般六个小时后就能长满,但活性很差。

[ 发自小木虫客户端 ]
6楼2014-04-12 09:13:58
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