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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 【求助/交流】细胞慢慢变成碎渣是什么原因
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笑语盈盈

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】细胞慢慢变成碎渣是什么原因 已有3人参与

最近几周共进行六次细胞复苏，第一二次细胞复苏六小时后部分贴壁，形态较好，二十小时后全部分化；后面四次细胞复苏六小时后部分贴壁，形态较好，第二三天细胞大部分漂浮，形态较好，但细胞碎渣很多，慢慢的会全部变成碎渣。

【求助/交流】细胞慢慢变成碎渣是什么原因
E  image0022.jpg


【求助/交流】细胞慢慢变成碎渣是什么原因-1
E  image0023.jpg
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1楼 2014-04-11 10:00:37
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已支

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你这是培养多久的细胞？在多少倍镜下观察的？觉得应该是你细胞冻存时数量太少了~我一般25cm2细胞就接两管，每管一毫升多点，活性至少95%-98%。我复苏完24h后观察，细胞如果贴的好的话就换液，不用PBS冲洗，次日传代；贴的不好的话就多长一天，再观察细胞状态，不换液第三天传代。都是看细胞状态，时间没固定的~你后面四次复苏很好，我建议哈第二天换液试试，然后晚上或者第二天一传一，吹打一定要温柔要轻，机械损伤很大！这个细胞接的太少还长不起来~前期就接多一点~个人愚见！
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2楼2014-04-11 18:56:44
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shenrenren
3楼2014-04-11 21:37:36
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pumaatlarge

禁虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
4楼2014-04-11 22:53:40
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笑语盈盈

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 已支 at 2014-04-11 18:56:44
你这是培养多久的细胞？在多少倍镜下观察的？觉得应该是你细胞冻存时数量太少了~我一般25cm2细胞就接两管，每管一毫升多点，活性至少95%-98%。我复苏完24h后观察，细胞如果贴的好的话就换液，不用PBS冲洗，次日传代 ...

即使能复苏，细胞状态也不好，稍微被刺激就漂了。

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5楼2014-04-12 09:12:25
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笑语盈盈

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by pumaatlarge at 2014-04-11 22:53:40
最近几周共进行六次细胞复苏，第一二次细胞复苏六小时后部分贴壁，形态较好，二十小时后全部分化；后面四次细胞复苏六小时后部分贴壁，形态较好，第二三天细胞大部分漂浮，形态较好，但细胞碎渣很多，慢慢的会全部变 ...

有换液这个是分瓶之后的，一般六个小时后就能长满，但活性很差。

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6楼2014-04-12 09:13:58
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