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竹林枫123

金虫 (小有名气)

[求助] 求助关于DNA传感器中,双链DNA的解旋及电极表面单链DNA间的杂交的问题

我要做的实验是关于DNA传感器的,现在遇到的问题是将双链DNA解旋后,上一条单链后再上另一条(解旋两次分别得到的),
结果,DNA不能和已在电极表面的单链DNA结合成双链的,(而且在杂交前后EIS表征的阻值不是增大而是减小),
      沉积单链时都是在1.7V的电位下电沉积的,
     解旋双链DNA的方法:5mgDNA和0.25Mmol NaCl,加热之后迅速放在冰水浴中,
     解旋另一条(互补DNA)是:5mgDNA和0.25Mmol NaCl和0.15Mmol柠檬酸钠,加热之后迅速放在冰水浴中,
     请大家帮忙分析,是哪里有问题呢,有相关文献也行,不胜感激~~
     谢谢!!
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smile~
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cqzhangzhang

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 竹林枫123 at 2014-04-25 09:02:53
我的的问题是如何解旋鲱鱼精DNA,使其成单链然后固定在修饰电极上,上面写的是我目前的实验操作,但得到的结果不正确,不知道是哪里的问题,可有什么建议呢?谢谢,谢谢~...

双链dna的解开和探针的结合是个问题。你用软件分别跑下两者的T值。看看这种竞争性置换反应发生的可能性。

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2014-04-25 20:58:51
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竹林枫123

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by cqzhangzhang at 2014-04-16 16:23:31
描述清楚点。

我的的问题是如何解旋鲱鱼精DNA,使其成单链然后固定在修饰电极上,上面写的是我目前的实验操作,但得到的结果不正确,不知道是哪里的问题,可有什么建议呢?谢谢,谢谢~
smile~
3楼2014-04-25 09:02:53
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竹林枫123

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by cqzhangzhang at 2014-04-25 20:58:51
双链dna的解开和探针的结合是个问题。你用软件分别跑下两者的T值。看看这种竞争性置换反应发生的可能性。
...

杂交用的DNA是与探针一样用同一种DNA解链得到的,T值是指什么呢?通过它怎么知道呢?
smile~
5楼2014-04-27 22:40:24
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cqzhangzhang

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 竹林枫123 at 2014-04-27 22:40:24
杂交用的DNA是与探针一样用同一种DNA解链得到的,T值是指什么呢?通过它怎么知道呢?...

你好好考虑下为什么双链DNA解开后不马上又结合,而是和电极上的探针结合。
6楼2014-04-29 13:06:16
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