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oliverwuwei

木虫 (小有名气)

[交流] 请教:成分分离问题

现有两个成分,在TLC上的Rf值之差远大于0.3,但是如何分都不能得到纯品,用的是硅胶柱,石油醚和乙酸乙酯的洗脱剂。
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licuibing

银虫 (小有名气)

这两个化合物的极性小不吗?可以考虑用反相柱分离啊,制备也可以啊.用正相你是用的H硅胶吗?
4楼2008-03-01 20:08:29
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jingjingkitten

铜虫 (小有名气)

以前听师姐说过,TLC上的Rf值与实际上硅胶柱的分离效果是有差异的,在TLC上分离较好,在硅胶柱上可能不能分开,不知是否可以尝试调节石油醚根乙酸乙酯的比例?我只是新手,师学为主.
真实坦然
2楼2008-03-01 10:29:34
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spuwk

银虫 (小有名气)

你的问题说的不清楚,分离与许多因素有关,比如化合物的类型,硅胶的用量,样品量,洗脱速率,柱子的粗细,样品上柱的方法,拌样硅胶量等,因为你的情况不明,实际上无法解决.
3楼2008-03-01 12:14:59
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yw9833

木虫 (小有名气)

应该能分开

★ ★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供!
oliverwuwei(金币+1,VIP+0):谢谢!
关键是不顺利时 别急着放大量,先用小柱子摸条件,耐心多做预试,许多细节要注意,例如:
1 注意上样量不能过大,否则脱尾,难以分开
2 薄层层析展开剂的比例,不能直接套用到柱层析的洗脱剂,根据预试结果及时做适当调整。
3 柱层析洗脱液分段收集要合理,必要时分得细一些,及时配合薄层层析抽检,以免已分离的组分又混合了。

如果急于得到少量纯品,对样品量不要求太大,柱层析又确实碰到困难时,也可以试用制备薄层
点样时要由左至右连续点样,使之成连续的线状,或条带状,而不是平时的有间距的斑点,展开后的图谱,如果分离条件好,也能得到相互分离的条带,将你需要的刮下即可,如果制备量少,比柱层析还方便。
      我做过有关试验,可以成功。
     请查阅有关参考书,一般专著会提到部分知识,可查找“制备薄层”部分,更重要的是要做预试,要摸分离条件,摸点样量,要注意一些细节。

制备薄层 增加制备量的方法
可以用较宽一些的层析板,比如5cm、10cm、甚至是20cm,必要时也可以将5cm的层析板,重复制备几个,由此可以增加制备量。
5楼2008-03-01 23:33:08
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