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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 请各位学术界高手帮助分析下本人近期做的一张层析图吧，求指教~~万分感谢！
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lifred

新虫 (初入文坛)

[交流] 请各位学术界高手帮助分析下本人近期做的一张层析图吧，求指教~~万分感谢！ 已有3人参与

结果貌似不是很理想，因为刚接触还不会看，不知道原因，本人用的DEAE-Sepharose-FF离子交换柱，图是层析的结果图~~~
条件：
上样量3mg/ml ，共80ml
柱体积：16ml
平衡液TEMA：0.04M Tris-HCl,pH 7.5
梯度洗脱：0.5M NaCl 的TEMA溶液两步洗脱
流速：2ml/min
上样后先用平衡液洗9个柱体积，然后再用盐两步洗脱
请各位学术界高手帮助分析下本人近期做的一张层析图吧，求指教~~万分感谢！
92709370.snap.jpg
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1楼 2014-04-08 08:52:35
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kos900907

木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
wizardfan: 金币+2, 谢谢参与 2014-04-09 05:40:06
这个是线性梯度洗脱的吧。
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生物制药
2楼2014-04-08 10:30:10
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lifred

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by kos900907 at 2014-04-08 10:30:10
这个是线性梯度洗脱的吧。

是的，两步梯度洗脱，第一步到43%，第二步到100%
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3楼2014-04-08 11:28:10
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kos900907

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
fast flow 的填料貌似用于初步的提取或者去除一些东西吧，感觉手法还是比较粗。纯化的效果应该还要看样品的检测结果。呵呵，个人感觉，我也是刚入行。
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生物制药
4楼2014-04-08 12:05:56
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lifred

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by kos900907 at 2014-04-08 12:05:56
fast flow 的填料貌似用于初步的提取或者去除一些东西吧，感觉手法还是比较粗。纯化的效果应该还要看样品的检测结果。呵呵，个人感觉，我也是刚入行。

恩恩，可能吧，非常感谢~~
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5楼2014-04-08 22:11:59
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冰雨926

铜虫 (初入文坛)
纯化的什么啊
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6楼2014-04-17 16:05:41
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lifred

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 冰雨926 at 2014-04-17 16:05:41
纯化的什么啊

牛肉中的钙激活酶
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7楼2014-05-04 09:05:54
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用连续线性梯度洗脱试试看，如果再不行就接着用下一种方法。一种方法就能纯化的情况需要运气。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
8楼2014-05-04 15:05:00
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lifred

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2014-05-04 15:05:00
用连续线性梯度洗脱试试看，如果再不行就接着用下一种方法。一种方法就能纯化的情况需要运气。

好的，谢谢~~
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9楼2014-05-06 10:15:28
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