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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 医学 » 基础 » 细胞培养
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xingzk

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 赵洪宇Clytie at 2014-04-10 21:32:48
哦这样，那你是用多少胰酶才能吹得起来呢？然后再加培养基终止消化？我用10cm的皿，一般都加1ml 0.25%胰酶消化。...

不好意思，一直没上，没看到。。。。我们是多大浓度我没大注意，但我加2或者3ml。可以加血清终止消化。加培养基只是稀释了胰酶好像不能终止消化。
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11楼2014-05-12 21:10:28
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xingzk

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 赵洪宇Clytie at 2014-04-16 18:32:27
恩，我差不多也是这样做的，只是经常会吹出气泡。胰酶是解冻以后就放在四度保存的。无论如何非常谢谢你呀~...

加入血清的培养基吹打就是容易产生气泡。。这个好像很难避免。
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12楼2014-05-12 21:12:12
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ohneyzhang

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

胰酶消化时间过久的原因；解决方案：1.60mm的皿加2mm胰酶足够，消化时间自己摸索，显微镜下观察细胞变圆即可，晃动后细胞飘动就有些过了。培养基中和后迅速温柔吹打，然后在皿底频繁敲打，力度自己把握，最后十字形晃动皿后放回培养箱。有一点必须强调，同时消化多个皿时不要一次都加培养基中和，挨个儿加，本人发现，如果同时都加了，当你吹打完第一个后，再吹打剩下的皿时已经无法吹打下来了。
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13楼2014-05-14 12:47:06
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lijie6054

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

楼主，你的细胞是什么细胞？对于有些细胞，即使胰酶消化成单个细胞了，很快又会聚团，以前养的HT-29细胞就这样子。
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14楼2014-05-14 14:11:45
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