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赵洪宇Clytie

新虫 (正式写手)

应助: 2 (幼儿园)
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在线: 84.1小时
虫号: 2401191
注册: 2013-04-04
性别: MM
专业: 动脉粥样硬化与动脉硬化

[求助] 细胞培养已有4人参与

求问师兄师姐们一个非常基础但很困扰我的问题，为什么我在贴壁细胞传代时，经常出现胰酶消化后细胞很难吹落成单个状态，而是出现抱团的情况。我试着延长胰酶消化的时间，直到观察到细胞变为圆形并有成片脱落才终止消化，并加培养基进行吹打，但是仍然出现这种状况。我想问，是不是胰酶的问题还是操作的有问题？跪求大神指点

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命是弱者借口，运乃强者谦词

1楼 2014-04-07 14:06:42

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ohneyzhang

金虫 (著名写手)

应助: 87 (初中生)
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虫号: 2620168
注册: 2013-08-28
专业: 消化系统疾病其他科学问题

【答案】应助回帖

胰酶消化时间过久的原因；解决方案：1.60mm的皿加2mm胰酶足够，消化时间自己摸索，显微镜下观察细胞变圆即可，晃动后细胞飘动就有些过了。培养基中和后迅速温柔吹打，然后在皿底频繁敲打，力度自己把握，最后十字形晃动皿后放回培养箱。有一点必须强调，同时消化多个皿时不要一次都加培养基中和，挨个儿加，本人发现，如果同时都加了，当你吹打完第一个后，再吹打剩下的皿时已经无法吹打下来了。