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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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赵洪宇Clytie

新虫 (正式写手)

[求助] 细胞培养 已有4人参与

求问师兄师姐们一个非常基础但很困扰我的问题,为什么我在贴壁细胞传代时,经常出现胰酶消化后细胞很难吹落成单个状态,而是出现抱团的情况。我试着延长胰酶消化的时间,直到观察到细胞变为圆形并有成片脱落才终止消化,并加培养基进行吹打,但是仍然出现这种状况。我想问,是不是胰酶的问题还是操作的有问题?跪求大神指点
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命是弱者借口,运乃强者谦词
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赵洪宇Clytie

新虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 飞鸟12- at 2014-04-16 10:05:23
你的胰酶在配制的过程中加EDTA了么?是所有的细胞情况都一样呢,还是就个别的细胞株是这样的?因为有些细胞确实是容易抱团不好消化的

恩,加了的,胰酶都是中科院实验室订购配好后分发到细胞房冻存的。血管内皮细胞按理说不应该很容易抱团的,有时候可以吹成单个,有时候就很难,不知道具体是因为什么。
命是弱者借口,运乃强者谦词
8楼2014-04-16 11:54:19
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xingzk

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


赵洪宇Clytie: 金币+1, 有帮助 2014-04-10 21:41:20
抱团的细胞,我是先用胰酶吹打一下,然后再加入培养基吹打。你可以试试。
2楼2014-04-10 16:52:59
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赵洪宇Clytie

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xingzk at 2014-04-10 16:52:59
抱团的细胞,我是先用胰酶吹打一下,然后再加入培养基吹打。你可以试试。

哦这样,那你是用多少胰酶才能吹得起来呢?然后再加培养基终止消化?我用10cm的皿,一般都加1ml 0.25%胰酶消化。
命是弱者借口,运乃强者谦词
3楼2014-04-10 21:32:48
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myyounger

至尊木虫 (文坛精英)

路过顺便顶一下 祝楼主一切顺利!
4楼2014-04-11 08:37:14
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