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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 医学 » 基础 » 细胞培养
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赵洪宇Clytie

新虫 (正式写手)

[求助] 细胞培养 已有4人参与

求问师兄师姐们一个非常基础但很困扰我的问题，为什么我在贴壁细胞传代时，经常出现胰酶消化后细胞很难吹落成单个状态，而是出现抱团的情况。我试着延长胰酶消化的时间，直到观察到细胞变为圆形并有成片脱落才终止消化，并加培养基进行吹打，但是仍然出现这种状况。我想问，是不是胰酶的问题还是操作的有问题？跪求大神指点
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命是弱者借口，运乃强者谦词
1楼 2014-04-07 14:06:42
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赵洪宇Clytie

新虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 飞鸟12- at 2014-04-16 10:05:23
你的胰酶在配制的过程中加EDTA了么？是所有的细胞情况都一样呢，还是就个别的细胞株是这样的？因为有些细胞确实是容易抱团不好消化的

恩，加了的，胰酶都是中科院实验室订购配好后分发到细胞房冻存的。血管内皮细胞按理说不应该很容易抱团的，有时候可以吹成单个，有时候就很难，不知道具体是因为什么。
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命是弱者借口，运乃强者谦词
8楼2014-04-16 11:54:19
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xingzk

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
赵洪宇Clytie: 金币+1, ★有帮助 2014-04-10 21:41:20
抱团的细胞，我是先用胰酶吹打一下，然后再加入培养基吹打。你可以试试。
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2楼2014-04-10 16:52:59
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赵洪宇Clytie

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xingzk at 2014-04-10 16:52:59
抱团的细胞，我是先用胰酶吹打一下，然后再加入培养基吹打。你可以试试。

哦这样，那你是用多少胰酶才能吹得起来呢？然后再加培养基终止消化？我用10cm的皿，一般都加1ml 0.25%胰酶消化。
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命是弱者借口，运乃强者谦词
3楼2014-04-10 21:32:48
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myyounger

至尊木虫 (文坛精英)
路过顺便顶一下 祝楼主一切顺利！
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4楼2014-04-11 08:37:14
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