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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 求助：酶切的疑惑
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by Neo2000 at 2014-04-08 18:33:51
建议用质粒柱子回收
...

试试
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11楼2014-04-08 21:44:38
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不爱做实验

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
鬼羽帝魂: 金币+8, ★★★很有帮助 2014-04-10 10:48:41
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-04-10 12:46:48
回收需要注意的一些问题：
1.如果你已经看到目标条带，那么切胶时，要尽量保证把条带切下，而不切下太多的胶，
当然也不能把条带切坏（不过我一直困惑，如果我把条带切碎了到底能不能回收回来，未解啊！）
2.回收时，最好不要加过多的溶胶液，标准方法是说要称量再计算什么的，如果胶块不是很大很多，
  一般加500-600ul应该可以的
3.回收过程中涉及的用酒精洗脱，烘干，是否做好了?
4.另外，我最近才知道，忘了是在什么地方看到的，说即使回收后电泳，看不到条带，也是可以继续连接的，当时我就惊呆了，于是我试了一下啊，果然连上了，不过我觉得还是看到条带才放心。
5.至于其他的问题，不太好解释，能力有限
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12楼2014-04-09 21:29:13
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 不爱做实验 at 2014-04-09 21:29:13
回收需要注意的一些问题：
1.如果你已经看到目标条带，那么切胶时，要尽量保证把条带切下，而不切下太多的胶，
当然也不能把条带切坏（不过我一直困惑，如果我把条带切碎了到底能不能回收回来，未解啊！）
2.回 ...

1.条带切碎了，片段应该不会碎吧，即使碎了，也不会连上呀。
2.这个方法真没试过
3.我用的试剂盒，不用烘干的
4.这应该是条带量太少了，不过还是你那句话 还是看到条带才放心
非常感谢
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13楼2014-04-10 10:48:33
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不爱做实验

银虫 (正式写手)
引用回帖:
13楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-04-10 10:48:33
1.条带切碎了，片段应该不会碎吧，即使碎了，也不会连上呀。
2.这个方法真没试过
3.我用的试剂盒，不用烘干的
4.这应该是条带量太少了，不过还是你那句话 还是看到条带才放心
非常感谢...

客气了，我觉得还是加大要回收样品的量去电泳，再切胶回收，保证回收的多一点。。。有人说过可以将回收的再浓缩，不过没试过。。。
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14楼2014-04-10 11:47:31
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 不爱做实验 at 2014-04-10 11:47:31
客气了，我觉得还是加大要回收样品的量去电泳，再切胶回收，保证回收的多一点。。。有人说过可以将回收的再浓缩，不过没试过。。。...

恩  我现在就是切多点   回收
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15楼2014-04-10 18:56:23
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不爱做实验

银虫 (正式写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-04-10 18:56:23
恩  我现在就是切多点   回收...

等你好消息。。。
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16楼2014-04-10 19:43:22
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