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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » hepg2细胞遇到了大麻烦，求帮助！
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blckly

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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小雷想: 金币+20, ★有帮助, 空泡状态是不是有问题？我向卖细胞的反映说有空泡，他们说什么空泡是正常的，他们的细胞是经过国际认证的。 2014-04-17 20:05:59
这个现象跟我以前遇到过的有点像，首先换新的血清和培养基试试，培养基没有污染不代表可以用来培养细胞，也有可能里面营养成分已经缺失了，如果实在不行就用胎牛血清培养一段时间。
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11楼2014-04-17 16:42:27
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blckly

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

空泡指的是细胞团中间的亮度吧？出现部分亮点应该是正常的，我也见到过，起码对后续生长和实验影响不大，当然养得状态越好，细胞团中间亮点越少，当细胞重叠生长的时候也会出现这种亮点。
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12楼2014-04-18 18:43:39
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张平1118

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我养过这个细胞，是有抱团生长的，而且长得还慢，用mem培养基，澳洲血清先养起来，再次传代时密度大点。
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13楼2014-04-19 09:40:20
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yu756849034

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

七楼和八楼说的都挺好。你的细胞第一幅图是多少倍镜下拍出来的，可能是因为拍的原因导致这样的差劲图像。楼主说刚运过来的时候有亮泡，那个是因为细胞在路上颠簸之后导致生长状态变弱细胞贴壁能力下降进而细胞死亡漂浮在悬液之中。后来的图片可以看出细胞的生长状态已有好转，不过还有待很大的提高。楼主可以从消化上下下功夫，你的图中可以明显的看到好多细胞团聚集在一起，那个是因为消化不当引起的。主要可能是：1.消化时间过程，导致细胞消化过度，成片的脱落，出现细胞团；2.消化的过程中不要经常摇晃细胞瓶；3.细胞不要生长到太密，一般不要到八成以上。   还有楼主可以测量下你们的PBS的PH是多少，这个也是会影响细胞的生长状态的。
  这些就是我的建议啦，希望可以帮助到你。祝你好运！！！
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不作死不会死！！！
14楼2014-04-25 16:39:36
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董冉冉

金虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 地瓜大将军 at 2014-04-08 20:53:44
。。。癌细胞不会老化。。
以后不要再提这句了。。肿瘤细胞体外培养也会老化，变异，失去原本特性。
如果购买渠道不正规，细胞的状态会不好，同时可供传代的次数也不足。
从你图片来看，第一张图应该是发生了细胞 ...

我的细胞也出现了像第一张图那样的状况，聚团特别严重，重悬吹打的时候也吹不散，你知道可能是什么原因吗？谢谢
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趁着年轻，尽量多一些事情吧
15楼2014-09-09 12:52:11
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小雷想

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 董冉冉 at 2014-09-09 12:52:11
我的细胞也出现了像第一张图那样的状况，聚团特别严重，重悬吹打的时候也吹不散，你知道可能是什么原因吗？谢谢...

我得到的经验就是，这个细胞对pH很敏感，当放到培养箱里时，如果用的是不透气的培养瓶，必须把瓶口旋开，让二氧化碳进去去降低培养基的pH，因为在细胞操作的过程中培养基的二氧化碳会溢出导致pH升高。关于聚团的事，这个细胞有抱团生长的特性，我的也是，然后做流式的时候细胞根本分散不开
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16楼2014-09-13 21:04:09
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