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JGZYDX

新虫 (小有名气)

[求助] 酶切的目的 已有2人参与

其实没有特别的针对哪个实验,只是在许多实验中都见过酶切,包括自己做过的T-RFLP也用了酶切,有的网友连接转化了送去测序也用酶切,但其实我不大理解为什么进行酶切,所以,恳请大家说一下,大概什么状况下需要进行酶切???谢谢
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d00614028

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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JGZYDX: 金币+10, 有帮助, 谢谢 2014-04-02 18:23:06
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流! 2014-04-02 18:44:32
gyesang: 回帖置顶 2014-04-02 18:44:34
酶切的作用:
1. 初步确定质粒是否正确,通过在质粒上寻找不同的酶切位点,酶切电泳,看是否和预期一致。(构建载体的过程中,送测序前做酶切也是为了初步验证是否构建成功)
2. 构建载体的时候需酶切载体,如果用连接的方法的话目的片段也需要酶切才能装进载体中。
3. 使环状质粒线性化,用于转化。这个在酵母的基因重组经常碰到,向酵母中转入线性片段使其整合到酵母基因组中。BAC修改中也如此。
3楼2014-04-02 17:32:51
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夏天的普洱茶

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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JGZYDX: 金币+5, 有帮助, 谢谢 2014-04-02 18:22:15
JGZYDX: 金币+5, 有帮助, 谢谢 2014-04-02 18:22:17
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-04-02 18:44:25
测序前酶切是为了验证片段有没有连到载体上面。
2楼2014-04-02 17:13:45
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