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xiaoyabnu

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】固相萃取小柱

大家好,我最近要使用Waters生产的固相萃取小柱,分别为Silica、Al2O3和C18
,想请教一下大家:这些柱子分别是怎么活化的;需要分离的粗产品分别要用多大极性的溶剂溶解?这些柱子放干之后再次活化还能用吗?最后,使用这些柱子有什么注意事项呢?谢谢大家!

[ Last edited by 佳怡 on 2009-4-28 at 20:20 ]
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cqyc007

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
xiaoyabnu(金币+5,VIP+0):谢谢!
Waters的HLB柱70~80元一个,如果一次性使用太浪费了,就HLB来说,活化就用甲醇就行了,活化之前一定要把填料按紧,待甲醇流完是立即加入纯水,千万不能让柱子干了哦,然后上样,溶解样品最好用极性大一点的溶剂,极性太强容易穿透(有必要可以测一下穿透体积),另外样品浓度不能太高,这样也容易穿透。然后就是洗脱,可以根据你的需要选定不同的溶剂强度来洗脱样品。最后活化,先用10ml乙酸乙酯冲洗,抽干,然后用丙酮冲洗,抽干,最后用甲醇冲洗,抽干待用,这样一般能洗得比较干净。oasis HLB column实际上和普通的reverse-phase column一样,只是粒径大小不同罢了,SPE一般是40~50u,反相柱一般5u居多,他得机理和反相柱也一样。
6楼2008-03-04 13:32:42
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wingcat

荣誉版主 (知名作家)

★ ★ ★ ★ ★
xiaoyabnu(金币+5,VIP+0):谢谢!
具体要看萃取小柱的使用说明以及样品的性质。
1、C18一般是采用甲醇来活化,然后用弱的溶剂来平衡,一般采用水或缓冲液。
2、需要知道产品的情况才能确定,
3、我们一般是一次性使用,害怕有残留。
2楼2008-02-27 22:23:45
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hifimxd

木虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
xiaoyabnu(金币+5,VIP+0):谢谢!
Silica、Al2O3属于正相,主要是吸附作用,用于去除弱到中等极性物质,通常用提取液所用的溶剂活化,用含少量1%-5%中等极性溶剂的非极性溶剂淋洗,用含5%-50%中等极性到极性溶剂的非极性 溶剂洗脱。
C18属于反相,用水溶性溶剂活化,如甲醇、乙腈等;用含5-50%极性溶剂的体系淋洗,用极性或非极性溶剂洗脱。
放干之后基本不能用了,不建议重复使用;如果杂质很少可以考虑用2-3次,但要看具体情况,以前很穷的时候用过。
其他注意事项要考虑固相小柱的容量,活化、淋洗、洗脱等步骤的速度等。
3楼2008-02-27 23:13:22
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xiaoyabnu

木虫 (正式写手)

那对于Al2O3来说,我要吸附F-,那就应该用极性弱的溶剂平衡了?上样时应选用有机溶剂?
4楼2008-02-27 23:13:58
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