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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】固相萃取小柱
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xiaoyabnu

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】固相萃取小柱

大家好，我最近要使用Waters生产的固相萃取小柱，分别为Silica、Al2O3和C18
,想请教一下大家：这些柱子分别是怎么活化的；需要分离的粗产品分别要用多大极性的溶剂溶解？这些柱子放干之后再次活化还能用吗？最后，使用这些柱子有什么注意事项呢？谢谢大家！

[ Last edited by 佳怡 on 2009-4-28 at 20:20 ]
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1楼 2008-02-27 22:06:45
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wingcat

荣誉版主 (知名作家)
★ ★ ★ ★ ★
xiaoyabnu(金币+5,VIP+0):谢谢！
具体要看萃取小柱的使用说明以及样品的性质。
1、C18一般是采用甲醇来活化，然后用弱的溶剂来平衡,一般采用水或缓冲液。
2、需要知道产品的情况才能确定，
3、我们一般是一次性使用，害怕有残留。
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2楼2008-02-27 22:23:45
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hifimxd

木虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
xiaoyabnu(金币+5,VIP+0):谢谢！
Silica、Al2O3属于正相，主要是吸附作用，用于去除弱到中等极性物质，通常用提取液所用的溶剂活化，用含少量1%-5%中等极性溶剂的非极性溶剂淋洗，用含5%-50%中等极性到极性溶剂的非极性 溶剂洗脱。
C18属于反相，用水溶性溶剂活化，如甲醇、乙腈等；用含5-50%极性溶剂的体系淋洗，用极性或非极性溶剂洗脱。
放干之后基本不能用了，不建议重复使用；如果杂质很少可以考虑用2-3次，但要看具体情况，以前很穷的时候用过。
其他注意事项要考虑固相小柱的容量，活化、淋洗、洗脱等步骤的速度等。
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3楼2008-02-27 23:13:22
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xiaoyabnu

木虫 (正式写手)
那对于Al2O3来说，我要吸附F-，那就应该用极性弱的溶剂平衡了？上样时应选用有机溶剂？
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4楼2008-02-27 23:13:58
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richymmy

引用回帖:
Originally posted by wingcat at 2008-2-27 22:23:
具体要看萃取小柱的使用说明以及样品的性质。
1、C18一般是采用甲醇来活化，然后用弱的溶剂来平衡,一般采用水或缓冲液。
2、需要知道产品的情况才能确定，
3、我们一般是一次性使用，害怕有残留。

怎样才能提高C18的capacity and  retention？前面的学生用C18 纯化同种物质，capacity很高，而且效率也很好。但我一直都无法重复他的实验。Capacity低了很多，而且洗涤效率也很低。
请问C18和操作温度有关吗？比如说在室温下或低温房操作，会有区别吗？

另外WATERS还有一种oasis HLB column，它亲水-亲脂，而且PH很宽，但这些特性和普通的reverse-phase column，如C18 有什么区别吗？
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5楼2008-02-29 01:03:16
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cqyc007

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
xiaoyabnu(金币+5,VIP+0):谢谢！
Waters的HLB柱70～80元一个，如果一次性使用太浪费了，就HLB来说，活化就用甲醇就行了，活化之前一定要把填料按紧，待甲醇流完是立即加入纯水，千万不能让柱子干了哦，然后上样，溶解样品最好用极性大一点的溶剂，极性太强容易穿透（有必要可以测一下穿透体积），另外样品浓度不能太高，这样也容易穿透。然后就是洗脱，可以根据你的需要选定不同的溶剂强度来洗脱样品。最后活化，先用10ml乙酸乙酯冲洗，抽干，然后用丙酮冲洗，抽干，最后用甲醇冲洗，抽干待用，这样一般能洗得比较干净。oasis HLB column实际上和普通的reverse-phase column一样，只是粒径大小不同罢了，SPE一般是40～50u，反相柱一般5u居多，他得机理和反相柱也一样。
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6楼2008-03-04 13:32:42
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