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SDS-PAG电泳问题
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各位虫友大家好! 最近,实验室跑SDS-PAGE电泳时总出现电泳缓冲液在电泳的过程中变浑浊有点黑,而且电泳速度也比原来慢了很多,跑完后染色不是没有条带就是Marker模糊.这是为什么呀?谢谢各位的帮助. |
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你的情况我从以下几个方面说 1,缓冲液用的次数太多了,电泳过程中会混浊,上面一层泡沫(明显比新配的要多的多),同电流下电泳速度会明显变慢很多 2,蛋白样品的问题,蛋白样品浓度太低,样品盐浓度太高都会跑不出条带,但浓度太低对电泳速度没有影响,盐浓度太高就对电泳速度有明显的影响了 3,胶配方,所有配方都正确的情况下,APS是只能保存两周的(我们实验室的实验说明上说只能保存一周,我用过两周的也没有问题) 从你所说的现象我的分析是这样的 1,Marker没有问题,只是经后电泳的时候多加点就会亮了 2,胶存在部题的可能性也不大 3,缓冲液到了该换的时候了 4,样品需要脱盐(这一点我不是太肯定,你换了缓冲液试一下,不行的话可能就要考虑这个因素了) |
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