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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 免疫实验 » 包涵体如何作为抗原去打兔子？
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zhjzhou

木虫 (著名写手)

[求助] 包涵体如何作为抗原去打兔子？ 已有2人参与

大侠们，我有一个原核表达的载体，现在蛋白诱导出来了，是包涵体，想去做为抗原，去打兔子，做当体，怎么办啊？
我已经纯化出来了，过了柱子，加了变性剂，可以直接做透析吗？透析完后可以直接拿蛋白作为抗原打兔子吗？
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1楼 2014-04-02 10:08:58
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liuderong

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zhjzhou: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢应助！ 2014-04-02 14:08:23
zhjzhou: 金币+5, ★★★很有帮助, 准备试试看，十分感谢你的建议！ 2014-04-03 08:12:10
如果蛋白没有什么特别的结构，那一般透析后是可以免疫的。
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2楼2014-04-02 11:11:33
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zhjzhou

木虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liuderong at 2014-04-02 11:11:33
如果蛋白没有什么特别的结构，那一般透析后是可以免疫的。

现在蛋白里有变性剂啊，用PBS做透析的话，会不会有沉淀出来。
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3楼2014-04-02 14:07:37
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liuderong

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by zhjzhou at 2014-04-02 14:07:37
现在蛋白里有变性剂啊，用PBS做透析的话，会不会有沉淀出来。...

要试过了才知道，要是担心会沉淀，你可以取个小样试试看。
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4楼2014-04-02 18:24:04
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zhjzhou

木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by liuderong at 2014-04-02 18:24:04
要试过了才知道，要是担心会沉淀，你可以取个小样试试看。...

正准备试试看，谢谢！
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5楼2014-04-03 08:12:47
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啊Q精神

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
zhjzhou: 金币+23, 谢谢！ 2014-04-09 08:15:37
纯化后纯度，量够，透析完蛋白没问题就可以打兔子了，
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6楼2014-04-05 14:51:05
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zhjzhou

木虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 啊Q精神 at 2014-04-05 14:51:05
纯化后纯度，量够，透析完蛋白没问题就可以打兔子了，

透析试了下，有很小很小的白点出来，是不是我原来的蛋白又折叠回去了啊，那这样就没有用了吧。
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7楼2014-04-09 08:15:41
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hlwnxfd2011

银虫 (小有名气)
那是聚集的蛋白沉淀下来的吧，透析缓冲也要加urea，不需要复性，变性的抗原去制备抗体效果更好。紧供参考。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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8楼2015-04-29 17:09:31
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