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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 天然生物材料 » 【请教】请教测DNA浓度的计算公式
汕头大学海洋科学接受调剂
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chyy82

金虫 (小有名气)

[交流] 【请教】请教测DNA浓度的计算公式

各位朋友：
　　我要测配合物与小牛胸腺DNA的结合常数，但不知道DNA的浓度如何测量．所以去查了几天文献，结果还是没有找到那个测量的公式，有谁知道啊？万分感激

[ Last edited by yusen_1982 on 2009-2-14 at 15:09 ]
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生活无限好，一路支持小木虫
1楼 2008-02-27 14:21:34
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weihui_cn

金虫 (职业作家)
★
wangkj80(金币+1,VIP+0):ok
波长260 nm处1 OD的吸收值相对于 33微克 DNA.

相关文献：
Electrochemistry Communications
Volume 9, Issue 7, July 2007, Pages 1474-1479

[ Last edited by weihui_cn on 2008-3-29 at 15:51 ]
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2楼2008-03-29 15:48:24
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1979yanzi

★
wangkj80(金币+1,VIP+0):ok
测定DNA在260 nm和280 nm的吸光度(A260=0.3277，A280=0.172，A260/A280=1.91)，A260/A280>1.8，表明DNA中不含有蛋白质。根据ε260=6600 mol-1•cm-1，A=εbc
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3楼2008-05-08 17:09:49
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figo2617

铜虫 (正式写手)
★
wangkj80(金币+1,VIP+0):ok
2楼的回答很准确 的  我想 你们 应该学生物无机的吧 我也是学这方面的  加我 QQ117900894 大家平时讨论讨论
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好好做好自己该做的事
4楼2008-05-27 10:23:39
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王小猫

金虫 (正式写手)

猫の妖
★
yusen_1982(金币+1,VIP+0):谢谢应助,欢迎常来 2-14 15:10
一般情况下  取5毫克ctDNA溶于10毫升二次水中所得的浓度   1×10-3 mol/L
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***九命猫妖***
5楼2008-09-20 09:36:15
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haoziying

至尊木虫 (职业作家)
★
yusen_1982(金币+1,VIP+0):谢谢应助,欢迎常来 2-14 15:10
DNA 在260nm 波长下，有强吸收。
在波长260nm 紫外线下，
1OD 的光密度=50μg/mL（双链DNA ） ；
1OD 的光密度=40μg/mL（单链DNA，单链RNA ）；
1OD 的光密度=33μg/mL（单链寡核苷酸 ）

按楼主所述，小牛胸腺DNA属于双链DNA，应按1OD 的光密度=50μg/mL（双链DNA ） 来计算。
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6楼2009-02-14 15:04:31
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stlion790

木虫 (正式写手)
★
yusen_1982(金币+1,VIP+0):谢谢交流,欢迎常来 2-14 16:34
五楼，有点异意，我们常用的是8.7mg溶于2.5ml二次水！
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7楼2009-02-14 16:14:03
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王小猫

金虫 (正式写手)

猫の妖
引用回帖:
Originally posted by stlion790 at 2009-2-14 16:14:
五楼，有点异意，我们常用的是8.7mg溶于2.5ml二次水！

那你的浓度呢？
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***九命猫妖***
8楼2009-02-16 08:41:58
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stlion790

木虫 (正式写手)
wgcui(金币+0,VIP+0):还请多多交流。说出具体道理。 2-16 17:09
1×10-3 mol/L ，你们实验室配的是不是有点稀
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9楼2009-02-16 12:55:47
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stlion790

木虫 (正式写手)
★
wgcui(金币+1,VIP+0):欢迎多多讨论！ 2-17 19:50
二楼回答的很准确，用紫外吸收来计算DNA浓度，测定DNA在260 nm和280 nm的吸光度A260/A280>1.8，表明DNA中不含有蛋白质。参考文献：J. Mol. Biol. (1961) 208-211
计算根据ε260=6600 mol-1•cm-1，A=εbc 参考文献：J. Am. Chem. Soc. 76 (1954) 3047-3053.
具体做的时候都是根据经验来配需要浓度的，做这方面的可以谈谈1×10-3 mol/L 是如何配的
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10楼2009-02-17 18:21:44
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