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a50044758

银虫 (小有名气)

[求助] 如何把DNA链上的nick(切刻)补齐。 已有2人参与

如何把DNA链上的nick(切刻)补齐。
用什么方法能将这个DNA链上的4个NICK补齐？因为建库要大量扩增这个DNA片段，切口平移的方式试过了，没有效果。谢谢（注：切刻的两端都是羟基，所以连接酶不能连接。）！
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1楼 2014-03-31 13:10:43
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biostar2009

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
a50044758(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-03-31 15:21:12
可以试试让大肠杆菌帮忙，想办法克隆到某个载体里，转化到菌里面
类似于脱磷载体，这种nick细胞内有专门的DNA ligase负责补平
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2楼2014-03-31 13:31:26
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csup123

捐助贵宾 (正式写手)

懒虫

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用T4 polymerase补平？不过这个酶3‘补平，5’端是切平
赞一下 回复此楼
哦
3楼2014-03-31 14:57:11
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