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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 酸洗玻璃珠回收问题
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飘逸的云

新虫 (小有名气)

[求助] 酸洗玻璃珠回收问题 已有2人参与

请问有人用过破碎酵母细胞壁的酸洗玻璃珠吗？这种玻璃珠能重复利用吗，能的话要如何处理？准备买一些，但是不知道效果怎么样。希望有大神能提供帮助！
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1楼 2014-03-25 15:03:54
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d00614028

银虫 (小有名气)

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飘逸的云(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-03-27 18:28:58
飘逸的云: 金币+4 2014-03-27 21:52:08
这个我做的比较多，你买的珠子是0.2mm的细小的珠子么，要是的话按上面说的酸洗就OK，我一般酸泡过夜，然后用水清洗10遍，烘干灭菌。

至于提蛋白的时候加多少，我是2OD的酵母细胞加100ul的珠子，100ul怎么控制的话，你可以用个PCR管先加100ul水，然后按照水的刻度把PCR管切开，这个就是100ul啦，再在这个相当于瓢的PCR管上加个用200ul的枪头沾上去的柄（用火烧的方法沾上去）可以用这个瓢来舀珠子了。哈哈  够详细了吧
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9楼2014-03-27 14:30:21
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gyesang

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飘逸的云: 金币+4, ★★★很有帮助 2014-03-25 15:43:32
玻璃珠可以重复利用，加在自来水里面加点HCl就可以，HCl加入的量我当时是凭感觉的，然后浸泡10min用清水冲洗干净，灭菌即可

我用玻璃珠破碎酵母时，由于我们有那种震荡的仪器，通过剧烈震荡，然后提DNA和蛋白质，效果还可以，如果你是手动研磨的话，那我就不知道了
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2楼2014-03-25 15:37:49
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gyesang

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3楼: Originally posted by 飘逸的云 at 2014-03-25 15:43:11
水和盐酸比大概是多少啊？漩涡震荡仪应该就可以了吧...

我当时是凭感觉的，大概1：50吧，你们没有那种震荡仪，只能用涡旋震荡了，虽然力量比较小，但也还可以了，可以试试
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4楼2014-03-25 15:50:54
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飘逸的云

新虫 (小有名气)
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2楼: Originally posted by gyesang at 2014-03-25 15:37:49
玻璃珠可以重复利用，加在自来水里面加点HCl就可以，HCl加入的量我当时是凭感觉的，然后浸泡10min用清水冲洗干净，灭菌即可

我用玻璃珠破碎酵母时，由于我们有那种震荡的仪器，通过剧烈震荡，然后提DNA和蛋白质， ...

水和盐酸比大概是多少啊？漩涡震荡仪应该就可以了吧
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3楼2014-03-25 15:43:11
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飘逸的云

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4楼: Originally posted by gyesang at 2014-03-25 15:50:54
我当时是凭感觉的，大概1：50吧，你们没有那种震荡仪，只能用涡旋震荡了，虽然力量比较小，但也还可以了，可以试试...

应该是50的水加1的浓盐酸吧
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5楼2014-03-25 16:34:30
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5楼: Originally posted by 飘逸的云 at 2014-03-25 16:34:30
应该是50的水加1的浓盐酸吧...

是的，肯定是盐酸少啊
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6楼2014-03-25 16:49:05
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飘逸的云

新虫 (小有名气)
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6楼: Originally posted by gyesang at 2014-03-25 16:49:05
是的，肯定是盐酸少啊...

追问一下，你破胞的时候玻璃珠加的量是和酵母菌体体积一样还是和总的缓冲液体积一样
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7楼2014-03-27 13:20:05
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7楼: Originally posted by 飘逸的云 at 2014-03-27 13:20:05
追问一下，你破胞的时候玻璃珠加的量是和酵母菌体体积一样还是和总的缓冲液体积一样...

珠子不用加太多，都是凭目测，没有具体测体积
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8楼2014-03-27 14:12:16
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d00614028

银虫 (小有名气)

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对了，用漩涡震荡的话起码要震荡15min啊。
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10楼2014-03-27 14:31:03
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