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我的目的因为2.8kb,用pet28a-sumo的载体进行重组表达。重组后用质粒进行PCR可以扩出目的条带；酶切鉴定也是对的，测序存在三个点突变，但用NCBI中的ORF finder进行分析结果如图： 从图来看，我的重组质粒应该没问题。但我将重组质粒转化到BL21（DE3）中，在18、37 摄氏度均不表达。请问这是什么原因？！之前我用pet17b做载体可成功在BL21（DE3）中表达，可这次换个载体为什么在BL21（DE3）中就不表达了？！！ 急需帮助，谢谢！！！  图片1.jpg |
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9楼2014-03-26 17:17:19
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4楼2014-03-25 15:35:02