| 查看: 2834 | 回复: 1 | ||
[求助]
求救贴壁细胞TUNEL染色方法 已有1人参与
|
|
使用的试剂盒是南京Vazyme公司 TUNEL FITC Apoptosis Detection Kit 文章投稿使用的DAPI，审稿人要求补充TUNEL，没想到这个鬼实验这么难搞啊 我们使用的是贴壁神经细胞PC12，加药处理完毕后，多聚甲醛4度固定1h，然后蛋白酶K通透了30min，专用PBS平衡液平衡30min，最后就是染色37度孵育1h.封片。之后避光保存，由于荧光显微镜出了故障，等了大概4h开始拍照，调整参数是曝光2s，增强4.6倍。问题来了 1.不论是不加药的CK对照组，还是加药凋亡明显（之前DAPI很明显）组，镜头下几乎看不到绿光。 2.即使好不容易调节出了荧光，染的感觉也不是细胞核那种一个个圆的，而是一小片一小片的细胞整体。 请大家解惑，如何改进？或者提供经验？谢谢 |
回复此楼» 猜你喜欢
重要来源：本周末出结果
已经有6人回复
-
结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。
已经有4人回复
-
2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B?
已经有11人回复
-
FileCode能看出啥？
已经有23人回复
-
应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键
已经有36人回复
-
关于Filecode分析方法
已经有9人回复
-
不应该看fileCode
已经有6人回复
-
好奇怪的filecode
已经有6人回复
-
长年满屏的广告，版主太不责任了。基金也等的急
已经有4人回复
-
filecode
已经有15人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- TUNEL和DAPI双染，怎么每个细胞都染上了
已经有6人回复
- 【求助】细胞荧光成像方法或细胞染色技术
已经有15人回复
- 【求助/交流】一步法TUNEL细胞凋亡检测贴壁细胞凋亡，必须用抗荧光猝灭封片液封片吗？
已经有4人回复
shaohe2013
铁杆木虫 (正式写手)
- 应助: 22 (小学生)
- 金币: 7474.2
- 红花: 3
- 帖子: 666
- 在线: 318.8小时
- 虫号: 2611383
- 注册: 2013-08-22
- 专业: 中医药学研究新技术和新方
2楼2014-03-22 09:18:21
