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593341681

新虫 (初入文坛)

[求助] 蛋白质荧光 已有2人参与

我的蛋白质目测就可以观察到荧光,用280nm激发,在350nm(色氨酸残基)和600多都有出峰(溶剂是PBS,没有峰),我想问一下用确定的波长(如280nm)激发,蛋白质是否应该只出现一个峰?是因为我的样品不纯吗?拜托了
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赠人玫瑰,手留余香
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pennchem

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
593341681: 金币+5 2014-03-25 09:04:08
620nm应该在可见光的范围内,做实验的时候,把窗户,灯都关上然后再看看?
行至水穷处,坐看云起时
6楼2014-03-24 09:03:03
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
593341681: 金币+5 2014-03-22 16:30:59
silicare: BioEPI+1 2014-03-27 09:39:35
350nm是色氨酸的emission,但是600nm应该不是,波长不会shift如此之多,很有可能是你的蛋白结合了金属或者其他的cofactor发出的可见光,这个需要看你蛋白是哪个家族的。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

行至水穷处,坐看云起时
2楼2014-03-21 14:22:58
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593341681

新虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2014-03-21 14:22:58
350nm是色氨酸的emission,但是600nm应该不是,波长不会shift如此之多,很有可能是你的蛋白结合了金属或者其他的cofactor发出的可见光,这个需要看你蛋白是哪个家族的。

谢谢你,我的蛋白质紫外的特征吸收峰在600多
还有我想问一下,是不是用特定波长激发蛋白质只会出现一个峰?
赠人玫瑰,手留余香
3楼2014-03-21 17:23:08
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
593341681: 金币+15, ★★★很有帮助 2014-03-23 21:36:38
不一定的,看你的蛋白里面有多少个官能团能被这个光激发,还有可能是你用280激发,然后色氨酸发出330nm,然后这个330nm作为激发光,然后被另一个接收,然后发出600nm的光。

你可以单独用330nm激发试试看,能否在600nm处看到?
行至水穷处,坐看云起时
4楼2014-03-22 17:00:28
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