24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 514  |  回复: 3
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

我听五月天

木虫 (正式写手)

[求助] 【回复此贴,版主奖励加倍】双波长法测定MTT结果和颜色明显不成正比怎么办?已有1人参与

小弟用MTT测定药物对细胞抑制率,酶标仪双波长用的是492和630,结果两个波长下的差值跟颜色明显不成正比,这是什么原因?
我具体操作是这样的-做了12个不加药的对照孔,想看DMSO溶解前用PBS清晰孔和不清洗的区别,八个孔清洗了一次,四个孔没有清洗,结果没有清洗的颜色明显比清洗过的要深,在492纳米处吸收跟颜色成正比,而两波长下的差值跟颜色不成正比。每孔加入DMSO之后,任意取一个清洗过的孔中的溶液出来,来用紫外测到最大吸收在502纳米处。
这样是不是说明我以后应该用酶标仪单波长492纳米处测96孔板的MTT?

[ Last edited by silicare on 2014-3-21 at 08:13 ]
回复此楼
为爱而生
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

司徒程落

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

贴壁细胞我用的570nm测定,630nm参比波长。悬浮细胞不用参比波长。
结果平行度还好。
4楼2015-04-21 17:06:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 我听五月天 的主题更新
信息提示
请填处理意见