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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 大质粒纯化浓缩应该用什么方法啊？
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郁灵子

金虫 (初入文坛)

[求助] 大质粒纯化浓缩应该用什么方法啊？ 已有2人参与

我的是提取好的质粒，用dd水溶的，想纯化浓缩一下，在网上看到的方法是：
质粒用等体积的酚/氯仿抽提一次，重复此步骤，加入两倍体积的无水乙醇和1/10体积的3 mol/L乙酸钠溶液后混匀，零下20摄氏度沉淀30 min后12000 r/min离心10 min，沉淀用75%乙醇洗涤一次，12000 r/min离心5 min，弃上清，沉淀自然干燥后溶于20～40微升去离子水中或者0.5 mol/L pH8.0的TE中。
可是从一加入两倍体积无水乙醇开始，就出现了雪花状或者雾状沉淀，根本不像DNA啊，蛋白也不像，硬着头皮按步骤做完，最后用水溶，可是，溶不了了，连电泳都没心情跑了，这是咋回事啊？
除了这个方法，还有什么好的方法能纯化浓缩大质粒的么？
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1楼 2014-03-11 22:32:34
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liuderong

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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郁灵子(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-03-31 18:05:29
还是先跑个电泳看看效果吧，说不定白色的是蛋白之类的污染物。
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2楼2014-03-12 13:23:43
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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感谢参与，应助指数 +1
郁灵子(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-03-31 18:05:35
大提的样品容易出现这种现象，你可以用冷冻干燥离心机浓缩一下。
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hehe
3楼2014-03-12 21:26:43
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