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slthree

金虫 (小有名气)

[交流] 请教有关厌氧菌筛选与分离的问题

首先给小木虫里的全体虫友们拜个年,祝大家戊子鼠年万事如意!
我的研究方向是利用厌氧菌处理废水中难降解有机物。以前都是用厌氧的混合菌群做实验,取得一定效果,现在想将课题深入做下去,打算筛选分离出单一的纯菌种,但我对微生物筛选并不熟悉,听说实验周期比较长,请各位虫友帮忙解决一些疑惑并提出一些建议。谢谢。
问题:经过简单驯化后,厌氧微生物的筛选和分离实验的周期大概需要多长时间?主要难点是什么?
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slthree

金虫 (小有名气)

★
reasonspare(金币+1,VIP+0):送一个积极交流奖
做微生物实验的工作量是很大,但既然自己做出了选择,我就必须坚持到底。
我和导师都是搞环境研究的,这个课题的前期实验只得出结论:用厌氧方法可以使目标污染物得到有效降解。为了使课题深入,现在必须要做纯菌种的研究,而我没有微生物细致研究的基础,所以请教各位生物学专家。
对于楼上的问题,我现在还不能回答,因为实验还没有进展到这一步,我准备3月份开始着手。我想楼上的虫友应该是做过微生物实验的,您的意思是不是建议我首先做个探索实验,看以单一有机物为底物,培养基上能否长出单菌落?
9楼2008-02-17 15:53:03
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zhjcao

木虫 (小有名气)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.
你要降解的有机物是单一的还是混和的?以这种有机物为碳源做培养基,然后把混和菌配成一定浓度铺平板,挑单菌落,验证。就这些。厌氧微生物分离培养主要是要有设备,你用的是哪儿的厌氧培养箱?我认为这是关键!
2楼2008-02-13 08:24:13
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llvi

金虫 (小有名气)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.
推荐你2篇文章:Isolation and Characterization of a New Clostridium sp. That Performs Effective Cellulosic Waste Digestion in a Thermophilic Methanogenic Bioreactor  AEM.72.5.3702–3709.2006
Clostridium straminisolvens sp. nov., a moderately thermophilic, aerotolerant and cellulolytic bacterium isolated from a cellulose-degrading bacterial community November 1, 2004

就如2楼所说,筛选厌氧单菌,厌氧培养装置比较重要,最好是厌氧培养箱中进行菌种继代培养。再有就是培养基(碳源)等的限制培养,我也分离厌氧单菌,感觉并不很容易,运气好,平板可以长,运气不好,即使是在厌氧条件下,很难在平板上长出单菌落,所以,有时培养基的选择也很重要。
3楼2008-02-13 14:06:19
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slthree

金虫 (小有名气)

我实验中要降解的是单一有机物,用的主要设备是厌氧手套箱。
3楼的虫友讲得很实诚,我也认为培养基的选择十分重要(尤其是碳源的选择)。我做的是难降解有机物,以它为唯一碳源能不能分离出纯菌种还是未知数(因为前期的实验结论有可能是多种菌群共同作用的结果)。现在面临的是两个问题:一是外加有机碳源会对纯菌种的分离造成什么样的影响?二是国外有人用CO2充当碳源,不知道有虫友做过吗?认为可不可行?
我现在是硕士研究生二年级,希望和您交个朋友,一起学习交流。我的QQ:18120884,
E-mail:slthree@163.com。
谢谢2楼和3楼的虫友!谢谢3楼虫友推荐的文章!
4楼2008-02-13 15:48:35
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