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slthree

金虫 (小有名气)

[交流] 请教有关厌氧菌筛选与分离的问题

首先给小木虫里的全体虫友们拜个年,祝大家戊子鼠年万事如意!
我的研究方向是利用厌氧菌处理废水中难降解有机物。以前都是用厌氧的混合菌群做实验,取得一定效果,现在想将课题深入做下去,打算筛选分离出单一的纯菌种,但我对微生物筛选并不熟悉,听说实验周期比较长,请各位虫友帮忙解决一些疑惑并提出一些建议。谢谢。
问题:经过简单驯化后,厌氧微生物的筛选和分离实验的周期大概需要多长时间?主要难点是什么?
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zhjcao

木虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.
asr(金币+3,VIP+0)::P 多谢。
这就是做生物的和工科的不同,一般我看生物的做实验文献,就是这样:以单一有机物为底物,培养单菌落,以一种或几种最有效的然后分离鉴定,做机理,一股脑做下去。做工科的是混和做,先不管是什么,只要有效就行,但这样使得应用效果有限,因此现在许多环境做的好的实验室也转向机理与工艺并重。
因此我想你可以以单一有机物为底物,培养基上分离鉴定单菌落,然后可分两条路,一条路就是菌种间组合,得出合适高效降解工艺;另一条就是菌种鉴定,做机理。看到的文献一般再复杂的有机物都有菌可以将其代谢的。只不过菌种多,途径多,效率高。
一点建议!
10楼2008-02-17 16:50:56
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zhjcao

木虫 (小有名气)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.
你要降解的有机物是单一的还是混和的?以这种有机物为碳源做培养基,然后把混和菌配成一定浓度铺平板,挑单菌落,验证。就这些。厌氧微生物分离培养主要是要有设备,你用的是哪儿的厌氧培养箱?我认为这是关键!
2楼2008-02-13 08:24:13
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llvi

金虫 (小有名气)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.
推荐你2篇文章:Isolation and Characterization of a New Clostridium sp. That Performs Effective Cellulosic Waste Digestion in a Thermophilic Methanogenic Bioreactor  AEM.72.5.3702–3709.2006
Clostridium straminisolvens sp. nov., a moderately thermophilic, aerotolerant and cellulolytic bacterium isolated from a cellulose-degrading bacterial community November 1, 2004

就如2楼所说,筛选厌氧单菌,厌氧培养装置比较重要,最好是厌氧培养箱中进行菌种继代培养。再有就是培养基(碳源)等的限制培养,我也分离厌氧单菌,感觉并不很容易,运气好,平板可以长,运气不好,即使是在厌氧条件下,很难在平板上长出单菌落,所以,有时培养基的选择也很重要。
3楼2008-02-13 14:06:19
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slthree

金虫 (小有名气)

我实验中要降解的是单一有机物,用的主要设备是厌氧手套箱。
3楼的虫友讲得很实诚,我也认为培养基的选择十分重要(尤其是碳源的选择)。我做的是难降解有机物,以它为唯一碳源能不能分离出纯菌种还是未知数(因为前期的实验结论有可能是多种菌群共同作用的结果)。现在面临的是两个问题:一是外加有机碳源会对纯菌种的分离造成什么样的影响?二是国外有人用CO2充当碳源,不知道有虫友做过吗?认为可不可行?
我现在是硕士研究生二年级,希望和您交个朋友,一起学习交流。我的QQ:18120884,
E-mail:slthree@163.com。
谢谢2楼和3楼的虫友!谢谢3楼虫友推荐的文章!
4楼2008-02-13 15:48:35
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