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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » MTT测细胞毒性铺板细胞浓度
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luo_jiaojiao

木虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 我听五月天 at 2014-05-06 22:04:45
原来如此~我觉得一瓶铺6*60个差不多。因为我很少把一整瓶都铺板，一般是一瓶长满取一半出来稀释到30毫升左右来铺两块板子。以我现在学到的，最好是细胞长到底部面积的80%左右，是对数期，最好用这个阶段的细胞做实 ...

感觉好有用的样子……我试试吧，多谢前辈呀
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11楼2014-05-07 17:17:34
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我听五月天

木虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by luo_jiaojiao at 2014-05-07 17:17:34
感觉好有用的样子……我试试吧，多谢前辈呀...

不客气
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为爱而生
12楼2014-05-07 22:38:36
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CacaoPie

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
luo_jiaojiao: 金币+1, ★有帮助 2014-05-08 09:13:49
看你养的是什么细胞，你可以先计数几次，然后每次接完板之后看一下细胞数，可以美24h观察一次，加MTT前一定要观察，看看细胞是否恰好铺满孔低，然后多做几次，调节一下之后就能根据经验接板了
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13楼2014-05-07 23:14:17
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若一禾

木虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 我听五月天 at 2014-05-06 22:04:45
原来如此~我觉得一瓶铺6*60个差不多。因为我很少把一整瓶都铺板，一般是一瓶长满取一半出来稀释到30毫升左右来铺两块板子。以我现在学到的，最好是细胞长到底部面积的80%左右，是对数期，最好用这个阶段的细胞做实 ...

你好，我想请教一下如何让确定细胞长到了底部面积的80%啊?还有关于细胞的对数期的理论特点可以谈谈吗  ，谢谢了
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好好地生活
14楼2014-05-24 10:18:53
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我听五月天

木虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 若一禾 at 2014-05-24 10:18:53
你好，我想请教一下如何让确定细胞长到了底部面积的80%啊?还有关于细胞的对数期的理论特点可以谈谈吗  ，谢谢了...

我其实没有特较真儿的研究过。我觉得80%就是显微镜下观察时，一个视野里的细胞占据视野面积80%左右吧，我没听过准确定量的方法。
对数期的理论特点是什么？细胞长到底部面积的80%左右是做细胞实验比较公认的对数期，但是如果这时就用，估计一瓶25cm2的瓶子的细胞全用上只能铺三块板子。如果一次试验不用铺很多板子可以这么做。但是我一次要4块板子以上。所以我平时是等它很满了才用。你可以观察一下，长到80%左右如果再放置一天，细胞会很密集，个体较未铺满时会变小。
还有，如果就要准确控制对数期，而且细胞需要量大，可以用75cm2的瓶子养细胞，不过我没有电动大容量移液器，所以用大瓶子很麻烦。
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为爱而生
15楼2014-05-24 14:26:24
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我听五月天

木虫 (正式写手)
细胞长到底部面积的80%左右是做细胞实验比较公认的对数期，但是如果这时就用，估计一瓶25cm2的瓶子的细胞全用上只能铺三块板子。如果一次试验不用铺很多板子可以这么做。但是我一次要4块板子以上。所以我平时是等它很满了才用。你可以观察一下，长到80%左右如果再放置一天，细胞会很密集，个体较未铺满时会变小。
还有，如果就要准确控制对数期，而且细胞需要量大，可以用75cm2的瓶子养细胞，不过我没有电动大容量移液器，所以用大瓶子很麻烦。
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为爱而生
16楼2014-05-24 14:27:05
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糖心蜜桃

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

我一般按照每孔多少个细胞计算 -  -然后计数板---然后稀释 你懂的。。。。

不过我一般第一次种板实验后，就在离心时候目测离心管底细胞厚度，然后再次重复实验种板时候我就根据目测厚度决定稀释倍数 （ 完全个人经验。。。。。针对不同细胞不同。。。）。。。
我这个方法比较冒险  仅限于楼主参考重复实验，即验证之前结果
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不会画画和弹钢琴的女生不是一个合格的医生..........
17楼2014-05-26 00:07:49
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