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luo_jiaojiao

木虫 (正式写手)

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[求助] MTT测细胞毒性铺板细胞浓度已有6人参与

在做MTT测细胞毒性时，铺板时细胞的浓度怎么把握啊？觉得用计数器数细胞太麻烦，能不能直接根据经验来稀释细胞呢，比如一瓶长满的细胞稀释到什么程度种板比较合适呢？

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1楼 2014-03-10 10:28:56

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我听五月天

木虫 (正式写手)

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引用回帖:

14楼: Originally posted by 若一禾 at 2014-05-24 10:18:53
你好，我想请教一下如何让确定细胞长到了底部面积的80%啊?还有关于细胞的对数期的理论特点可以谈谈吗，谢谢了

...

我其实没有特较真儿的研究过。我觉得80%就是显微镜下观察时，一个视野里的细胞占据视野面积80%左右吧，我没听过准确定量的方法。
对数期的理论特点是什么？细胞长到底部面积的80%左右是做细胞实验比较公认的对数期，但是如果这时就用，估计一瓶25cm2的瓶子的细胞全用上只能铺三块板子。如果一次试验不用铺很多板子可以这么做。但是我一次要4块板子以上。所以我平时是等它很满了才用。你可以观察一下，长到80%左右如果再放置一天，细胞会很密集，个体较未铺满时会变小。
还有，如果就要准确控制对数期，而且细胞需要量大，可以用75cm2的瓶子养细胞，不过我没有电动大容量移液器，所以用大瓶子很麻烦。