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reallpf

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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dllchina: 金币+5, MicEPI+1, good 2014-03-04 15:20:55
对酶活要求如何?
这就是一个本科微生物实验的基础综合实验之一。书上都有,也是我本科做的一个实验之一,周期大约9天即可得到能够降解苯酚的菌株。
具体做法仅供参考和各位虫友讨论:
1. 取土壤(取样都是常识,菜园、淤泥、落叶层等),无菌水重悬离心,接种约10 uL上清至LB培养基,37度摇床培养约36 h。
2. 将得到的菌悬液梯度稀释,分别取适量(约20 uL)涂平板(以苯酚为唯一碳源的富集培养基固体平板),37度培养约48 h。
3. 将得到的单菌落,划线涂布,分离菌落;平板采用以苯酚为唯一碳源的分离培养基,37度培养约48 h。
4.得到的单菌落即为可降解苯酚的细菌,单菌落周围在平板上形成的透明圈越大,代表酶活越高,根据自己的需要选择,接种LB,保藏甘油管。

整个过程顺利1周可完成。如需其它降解菌,将苯酚改为你的被降解底物即可。
2楼2014-03-04 11:42:02
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