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reallpf

木虫 (正式写手)

MicEPI: 21
应助: 150 (高中生)
金币: 3388.3
散金: 2
红花: 12
帖子: 342
在线: 72.6小时
虫号: 1892494
注册: 2012-07-14
性别: GG
专业: 微生物生理与生物化学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
dllchina: 金币+5, MicEPI+1, good 2014-03-04 15:20:55

对酶活要求如何？
这就是一个本科微生物实验的基础综合实验之一。书上都有，也是我本科做的一个实验之一，周期大约9天即可得到能够降解苯酚的菌株。
具体做法仅供参考和各位虫友讨论：
1. 取土壤（取样都是常识，菜园、淤泥、落叶层等），无菌水重悬离心，接种约10 uL上清至LB培养基，37度摇床培养约36 h。
2. 将得到的菌悬液梯度稀释，分别取适量（约20 uL）涂平板（以苯酚为唯一碳源的富集培养基固体平板），37度培养约48 h。
3. 将得到的单菌落，划线涂布，分离菌落；平板采用以苯酚为唯一碳源的分离培养基，37度培养约48 h。
4.得到的单菌落即为可降解苯酚的细菌，单菌落周围在平板上形成的透明圈越大，代表酶活越高，根据自己的需要选择，接种LB，保藏甘油管。

整个过程顺利1周可完成。如需其它降解菌，将苯酚改为你的被降解底物即可。

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2楼2014-03-04 11:42:02

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