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liuaynbin007

祝福

11楼2014-03-04 12:45:06

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鬼羽帝魂

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8楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-03-04 11:55:05
看大小直接跑个电泳图，为什么要先切开再看大小。。。可以把重组质粒跟未重组的质粒一起跑，比较一下大小试试，然后进行PCR验证是否有目的基因插入，这种方法不行吗？...

PCR验证没用，因为我是在启动子后面加了一个NOS,PCR检测不出来。因为不管怎么测，启动子，NOS都有。
先切开再看大小是因为质粒有3条带，不切开怎么比较？我是把重组质粒跟未重组的质粒单酶切以后一起跑的。

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12楼2014-03-04 14:32:36

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鬼羽帝魂

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9楼: Originally posted by 小月亮1990 at 2014-03-04 12:00:07
建议还是要测序的，能知道那个酶切位点是不是真的还在，也许会有突变呢，要不碱基变了，你怎么换条件也是切不开的啊！

恩，说得很在理，就是没动的酶切位点也切不开，好奇怪的事情。

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13楼2014-03-04 14:33:21

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西门吹雪170

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12楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-03-04 14:32:36
PCR验证没用，因为我是在启动子后面加了一个NOS,PCR检测不出来。因为不管怎么测，启动子，NOS都有。
先切开再看大小是因为质粒有3条带，不切开怎么比较？我是把重组质粒跟未重组的质粒单酶切以后一起跑的。...

还是求高手指点吧