应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 关于重组克隆实验中遇到的比较奇怪的问题
182/2返回列表上一页12
查看: 2560  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

liuaynbin007
祝福
11楼2014-03-04 12:45:06
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-03-04 11:55:05
看大小直接跑个电泳图，为什么要先切开再看大小。。。可以把重组质粒跟未重组的质粒一起跑，比较一下大小试试，然后进行PCR验证是否有目的基因插入，这种方法不行吗？...

PCR验证没用，因为我是在启动子后面加了一个NOS,PCR检测不出来。因为不管怎么测，启动子，NOS都有。
先切开再看大小是因为质粒有3条带，不切开怎么比较？我是把重组质粒跟未重组的质粒单酶切以后一起跑的。
赞一下 回复此楼
12楼2014-03-04 14:32:36
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 小月亮1990 at 2014-03-04 12:00:07
建议还是要测序的，能知道那个酶切位点是不是真的还在，也许会有突变呢，要不碱基变了，你怎么换条件也是切不开的啊！

恩，说得很在理，就是没动的酶切位点也切不开，好奇怪的事情。
赞一下 回复此楼
13楼2014-03-04 14:33:21
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-03-04 14:32:36
PCR验证没用，因为我是在启动子后面加了一个NOS,PCR检测不出来。因为不管怎么测，启动子，NOS都有。
先切开再看大小是因为质粒有3条带，不切开怎么比较？我是把重组质粒跟未重组的质粒单酶切以后一起跑的。...

还是求高手指点吧
赞一下 回复此楼
植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
14楼2014-03-04 14:35:44
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-03-04 14:35:44
还是求高手指点吧...

恩啊。谢谢你呀，你挺称职的。
赞一下 回复此楼
15楼2014-03-04 14:41:02
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-03-04 14:41:02
恩啊。谢谢你呀，你挺称职的。...

谢谢啊
回复此楼
植根于内心的修养；无需提醒的自觉；以约束为前提的自由；为别人着想的善良
16楼2014-03-04 15:02:30
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ytetyio09

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
鬼羽帝魂: 金币+4, ★有帮助 2014-05-31 16:45:36
可以试试这篇论文的方法，虽然是个小的改进，但是值得一试，而且很方便：
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24613256
赞一下(1人) 回复此楼
17楼2014-03-25 09:41:59
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
引用回帖:
17楼: Originally posted by ytetyio09 at 2014-03-25 09:41:59
可以试试这篇论文的方法，虽然是个小的改进，但是值得一试，而且很方便：
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24613256

谢谢
回复此楼
18楼2014-03-25 15:36:05
已阅   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 学员fBlk6m 的主题更新
182/2返回列表上一页12
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 3/150 2026-08-23 19:55 by lXgU0RvNTDC9
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 6/300 2026-08-23 19:31 by lXgU0RvNTDC9
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 19:22 by lXgU0RvNTDC9
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 3/150 2026-08-23 15:33 by KM5EcsNQRBPn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 5/250 2026-08-23 14:33 by KM5EcsNQRBPn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 6/300 2026-08-23 14:21 by KM5EcsNQRBPn
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 h4CP7TrQR8Lg 2026-08-22 5/250 2026-08-23 12:09 by LR9qGULyN2ew
[基金申请] 今天放榜吗？ +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 07:41 by OEbVnUOu01ol
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 5/250 2026-08-23 04:07 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 11/550 2026-08-23 02:55 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 13/650 2026-08-21 21:58 by alongwaytogo
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭