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lidesheng813

铁虫 (小有名气)

[求助] 污泥糖原的测定方法 !!!求各位大神 帮助小弟一下已有1人参与

如题
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新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

1.样品准备:取5mL混合液,离心后弃上清液(离心速度6000r/min,离心15min),用磷酸缓冲液冲洗,冲洗后再次离心,弃上清液,重复2次。取离心后沉积物在-54℃,0.1mbar条件下冷冻干燥24h,制备成冻干泥。
2.样品制备:在玻璃管中加入2mg冻干泥,加入0.6mol /L HCl溶液5mL,在100℃下消解3h,样品冷却至室温后,用漩涡搅拌器剪切1min,转至10mL离心管中,以2600r/min速度离心10min,取上清液。
3.样品测量:取10mL比色管,加入4mL蒽酮-硫酸溶液(0.2%的“蒽酮/80%H2SO4”溶液),加入1mL上清液,将比色管在100℃下水浴10min,然后在4℃的冷水中冷却5min,在625nm波长下测量,使用葡萄糖作为标准样。

试剂:
磷酸缓冲液:称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4•12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。
正丙醇
苯甲酸
二氯甲烷
无水硫酸钠
蒽酮
80%浓硫酸
葡萄糖
2楼2020-05-20 17:00:51
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