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weiyuanzheng

铜虫 (小有名气)

[求助] 实验室去离子水的PH 已有2人参与

实验室用的去离子水,高温灭菌后如果PH在6左右,如何调节PH到8.5,直接加tris-HCl等调节吗,具体怎么操作呢?谢谢啦
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

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7楼: Originally posted by weiyuanzheng at 2014-02-27 16:30:01
但是我试过,自己的灭菌水同在天根买的调过PH的灭菌水相比,胶回收后目的片段的浓度的确偏低!...

如果你没有试剂盒里的水,那就用灭菌的纯水吧,胶回收后一般都很低的,但是不影响接下去的实验。貌似用试剂盒里的elution water 会影响后面的实验,听师弟说的,具体的也不是太懂,我们都用水的
植根于内心的修养;无需提醒的自觉;以约束为前提的自由;为别人着想的善良
8楼2014-02-27 16:34:46
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

引用回帖:
9楼: Originally posted by weiyuanzheng at 2014-02-27 16:48:57
嗯,可能elution water会影响后续实验的酶活性吧?那特别想问问对于小分子DNA(100bp左右)的PCR产物,除了多加溶胶binding buffer外,如何才能提高胶回收效率呢?感觉浓度实在是有点低。...

我不清楚你们用的试剂盒是不是跟我们实验室一样,但是你在最后一步加水洗脱的时候要注意把水加到膜的正中,静置一分钟后再离心,并且此步可以重复一次
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10楼2014-02-27 19:30:00
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

植根于内心的修养;无需提醒的自觉;以约束为前提的自由;为别人着想的善良
12楼2014-02-28 11:07:06
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普通回帖

yipan

铜虫 (职业作家)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
实验室用去离子水PH一般6.8到7.2,你那的PH偏低,可加适量氢氧化钠调整。
2楼2014-02-27 10:20:07
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
不一样地方的水的pH是不一样的,而且用什么调节pH是根据你所要配制溶液的成分来判断的,不能随意带入其他离子
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3楼2014-02-27 14:12:49
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weiyuanzheng

铜虫 (小有名气)

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3楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-02-27 14:12:49
不一样地方的水的pH是不一样的,而且用什么调节pH是根据你所要配制溶液的成分来判断的,不能随意带入其他离子

我仅仅是要洗脱DNA,不想用试剂盒里的elution buffer,调节ph可以用elution里添加的成份来调节吗?
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4楼2014-02-27 16:12:10
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weiyuanzheng

铜虫 (小有名气)

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3楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-02-27 14:12:49
不一样地方的水的pH是不一样的,而且用什么调节pH是根据你所要配制溶液的成分来判断的,不能随意带入其他离子

对啦,实验室的去离子水是订购的,PH大概在7.2左右,试剂盒里说胶回收过柱时最佳的PH是8.5(也就是elution buffer的ph),我就是想调一下水的PH,避免用试剂盒里的elution buffer,有什么好的建议吗?
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5楼2014-02-27 16:14:42
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西门吹雪170

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引用回帖:
4楼: Originally posted by weiyuanzheng at 2014-02-27 16:12:10
我仅仅是要洗脱DNA,不想用试剂盒里的elution buffer,调节ph可以用elution里添加的成份来调节吗?...

洗脱DNA不能用水吧,水是用于溶解的,溶解DNA的话直接用灭菌水就好了,不用调节pH
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6楼2014-02-27 16:27:29
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weiyuanzheng

铜虫 (小有名气)

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6楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-02-27 16:27:29
洗脱DNA不能用水吧,水是用于溶解的,溶解DNA的话直接用灭菌水就好了,不用调节pH...

但是我试过,自己的灭菌水同在天根买的调过PH的灭菌水相比,胶回收后目的片段的浓度的确偏低!
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7楼2014-02-27 16:30:01
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weiyuanzheng

铜虫 (小有名气)

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8楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-02-27 16:34:46
如果你没有试剂盒里的水,那就用灭菌的纯水吧,胶回收后一般都很低的,但是不影响接下去的实验。貌似用试剂盒里的elution water 会影响后面的实验,听师弟说的,具体的也不是太懂,我们都用水的...

嗯,可能elution water会影响后续实验的酶活性吧?那特别想问问对于小分子DNA(100bp左右)的PCR产物,除了多加溶胶binding buffer外,如何才能提高胶回收效率呢?感觉浓度实在是有点低。
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9楼2014-02-27 16:48:57
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