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weiyuanzheng

铜虫 (小有名气)

[求助] 实验室去离子水的PH已有2人参与

实验室用的去离子水，高温灭菌后如果PH在6左右，如何调节PH到8.5，直接加tris-HCl等调节吗，具体怎么操作呢？谢谢啦
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1楼2014-02-27 09:23:08
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)
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7楼: Originally posted by weiyuanzheng at 2014-02-27 16:30:01
但是我试过，自己的灭菌水同在天根买的调过PH的灭菌水相比，胶回收后目的片段的浓度的确偏低！...

如果你没有试剂盒里的水，那就用灭菌的纯水吧，胶回收后一般都很低的，但是不影响接下去的实验。貌似用试剂盒里的elution water 会影响后面的实验，听师弟说的，具体的也不是太懂，我们都用水的
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8楼2014-02-27 16:34:46
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)
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9楼: Originally posted by weiyuanzheng at 2014-02-27 16:48:57
嗯，可能elution water会影响后续实验的酶活性吧？那特别想问问对于小分子DNA（100bp左右）的PCR产物，除了多加溶胶binding buffer外，如何才能提高胶回收效率呢？感觉浓度实在是有点低。...

我不清楚你们用的试剂盒是不是跟我们实验室一样，但是你在最后一步加水洗脱的时候要注意把水加到膜的正中，静置一分钟后再离心，并且此步可以重复一次
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10楼2014-02-27 19:30:00
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西门吹雪170

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12楼2014-02-28 11:07:06
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yipan

铜虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
实验室用去离子水PH一般6.8到7.2，你那的PH偏低，可加适量氢氧化钠调整。
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2楼2014-02-27 10:20:07
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西门吹雪170

荣誉版主 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不一样地方的水的pH是不一样的，而且用什么调节pH是根据你所要配制溶液的成分来判断的，不能随意带入其他离子
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3楼2014-02-27 14:12:49
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weiyuanzheng

铜虫 (小有名气)
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3楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-02-27 14:12:49
不一样地方的水的pH是不一样的，而且用什么调节pH是根据你所要配制溶液的成分来判断的，不能随意带入其他离子

我仅仅是要洗脱DNA，不想用试剂盒里的elution buffer，调节ph可以用elution里添加的成份来调节吗？
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4楼2014-02-27 16:12:10
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weiyuanzheng

铜虫 (小有名气)
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3楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-02-27 14:12:49
不一样地方的水的pH是不一样的，而且用什么调节pH是根据你所要配制溶液的成分来判断的，不能随意带入其他离子

对啦，实验室的去离子水是订购的，PH大概在7.2左右，试剂盒里说胶回收过柱时最佳的PH是8.5（也就是elution buffer的ph），我就是想调一下水的PH，避免用试剂盒里的elution buffer，有什么好的建议吗？
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5楼2014-02-27 16:14:42
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西门吹雪170

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4楼: Originally posted by weiyuanzheng at 2014-02-27 16:12:10
我仅仅是要洗脱DNA，不想用试剂盒里的elution buffer，调节ph可以用elution里添加的成份来调节吗？...

洗脱DNA不能用水吧，水是用于溶解的，溶解DNA的话直接用灭菌水就好了，不用调节pH
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6楼2014-02-27 16:27:29
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weiyuanzheng

铜虫 (小有名气)
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6楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-02-27 16:27:29
洗脱DNA不能用水吧，水是用于溶解的，溶解DNA的话直接用灭菌水就好了，不用调节pH...

但是我试过，自己的灭菌水同在天根买的调过PH的灭菌水相比，胶回收后目的片段的浓度的确偏低！
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7楼2014-02-27 16:30:01
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weiyuanzheng

铜虫 (小有名气)
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8楼: Originally posted by 西门吹雪170 at 2014-02-27 16:34:46
如果你没有试剂盒里的水，那就用灭菌的纯水吧，胶回收后一般都很低的，但是不影响接下去的实验。貌似用试剂盒里的elution water 会影响后面的实验，听师弟说的，具体的也不是太懂，我们都用水的...

嗯，可能elution water会影响后续实验的酶活性吧？那特别想问问对于小分子DNA（100bp左右）的PCR产物，除了多加溶胶binding buffer外，如何才能提高胶回收效率呢？感觉浓度实在是有点低。
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9楼2014-02-27 16:48:57
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