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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 配制5*SDS-PAGE电泳缓冲液的时候，甘氨酸总是不溶解怎么办
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小叶子0

铁虫 (小有名气)

[求助] 配制5*SDS-PAGE电泳缓冲液的时候，甘氨酸总是不溶解怎么办 已有6人参与

我用的配方是：Tris：15.1g   glycine：94g，   sds：5.0g
加入1L的水搅拌溶解，可是为什么用转子搅拌了大概两个小时还是有许多白色晶体沉淀在下面呢？室温大概15度左右。
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1楼 2014-02-23 15:46:48
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-02-23 23:48:33
小叶子0: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-02-24 16:18:35
...
    不好溶解的不是甘氨酸吧，应该是SDS吧
    甘氨酸和Tris都很好溶解的，至于SDS建议配成10% Stock Solution后 加液体就可以了
    祝实验顺利
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Let God do with it as He wills
2楼2014-02-23 15:56:30
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-02-23 23:48:52
我也认为是SDS不溶引起的，实验室都是先配SDS母液一般都需要加热一会。并且天冷容易结晶。
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hehe
3楼2014-02-23 20:23:28
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jiaolong11a

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
放在水浴锅加热一下，是sds的问题。37度既可以，几分钟就好
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多情总被无情扰。。。愁
4楼2014-02-24 08:51:12
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Hliotrope

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
肯定能溶，多转一下，我配1x的都能溶。
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Someone
5楼2014-02-24 09:13:41
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小叶子0

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by atlanticwi at 2014-02-23 15:56:30
...
    不好溶解的不是甘氨酸吧，应该是SDS吧
    甘氨酸和Tris都很好溶解的，至于SDS建议配成10% Stock Solution后 加液体就可以了
    祝实验顺利

嗯，谢谢啦，那你们的胶都是现配现用还是提前配好啊？如果提前配好可以放在SDS-PAGE缓冲液里面，4度冰箱过夜吗？这样子会不会把胶泡坏掉啊？
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6楼2014-02-24 10:41:05
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puma2003

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
时间要长才行，不行就水浴

[ 发自小木虫客户端 ]
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7楼2014-02-24 11:15:54
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
引用回帖:
6楼: Originally posted by 小叶子0 at 2014-02-24 10:41:05
嗯，谢谢啦，那你们的胶都是现配现用还是提前配好啊？如果提前配好可以放在SDS-PAGE缓冲液里面，4度冰箱过夜吗？这样子会不会把胶泡坏掉啊？...

配好后不拔梳子，放一次性PE手套中，4度可以放一天的，但不建议放很多天。有空就现用现配，没空就提前一天晚上配
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Let God do with it as He wills
8楼2014-02-24 14:06:33
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月夜饮雪

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
6楼: Originally posted by 小叶子0 at 2014-02-24 10:41:05
嗯，谢谢啦，那你们的胶都是现配现用还是提前配好啊？如果提前配好可以放在SDS-PAGE缓冲液里面，4度冰箱过夜吗？这样子会不会把胶泡坏掉啊？...

手套中可以加入少量buffer，省得胶会皲裂，用时，取也方便。

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9楼2014-02-24 16:01:37
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373641952

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 小叶子0 at 2014-02-24 10:41:05
嗯，谢谢啦，那你们的胶都是现配现用还是提前配好啊？如果提前配好可以放在SDS-PAGE缓冲液里面，4度冰箱过夜吗？这样子会不会把胶泡坏掉啊？...

SDS-PAGE胶的话，配好了，带着玻璃板放在保鲜膜上，上样孔和底端用水封好，再把保鲜膜包好。放四度一星期都没问题的
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10楼2014-03-28 14:06:15
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