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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » PCR问题
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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)

[求助] PCR问题 已有9人参与

最近做PCR，结果没加模板都能P出条带，后来把各个条件都依次换了，还是不加模板能P出目的条带，请问遇到过这种情况没，而且不管加什么引物都能P出相应的目的条带（也就是说其他同学做也是这种情况）
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1楼 2014-02-21 17:28:34
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蓝色麦田守望

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-02-22 12:46:12
更换你用的ddH2O，引物从新稀释，酶也重新换一管
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路漫漫其修远兮，吾将上下而求索
2楼2014-02-21 21:22:50
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鬼羽帝魂

木虫 (著名写手)
★
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2014-02-22 12:46:19
这是污染了。污染的最有可能是水，或者稀释的引物。
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3楼2014-02-21 21:28:49
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wangweijian

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
加UNG酶试试，dNTP换成带U的
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4楼2014-02-21 22:01:29
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jiaolong11a

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
泡菜肉丝(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-02-22 12:46:29
所有试剂都换一下新的，最好在超净工作台做，所有的枪及加样间都用紫外线照射下
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多情总被无情扰。。。愁
5楼2014-02-22 10:26:57
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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 蓝色麦田守望 at 2014-02-21 21:22:50
更换你用的ddH2O，引物从新稀释，酶也重新换一管

都换过了
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6楼2014-02-22 12:35:15
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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 鬼羽帝魂 at 2014-02-21 21:28:49
这是污染了。污染的最有可能是水，或者稀释的引物。

嗯，我们也是这种分析的，不过都换过，还是那样
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7楼2014-02-22 12:36:41
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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by jiaolong11a at 2014-02-22 10:26:57
所有试剂都换一下新的，最好在超净工作台做，所有的枪及加样间都用紫外线照射下

你意思是加样的时候也在紫外下？这么做过？
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8楼2014-02-22 12:39:23
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jiaolong11a

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by 泡菜肉丝 at 2014-02-22 12:39:23
你意思是加样的时候也在紫外下？这么做过？...

当然不是了，亲，是照射完之后再加样了，加样时紫外不要命了
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多情总被无情扰。。。愁
9楼2014-02-22 13:11:52
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泡菜肉丝

新虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wangweijian at 2014-02-21 22:01:29
加UNG酶试试，dNTP换成带U的

好像实验室没有这个酶。我用的是Q5
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10楼2014-02-22 13:12:46
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