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glzeng金虫 (小有名气)
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[交流]
求助：多肽分子量的测定（报酬5金币）
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各位大虾： 小弟最近一直都在做一个聚合物多肽，分子量在5000－10000左右，当然由于是通过聚合得到，分子量也可能大于一万。产品我已经拿到了，但是对于它的测定确一直找不到好的方法。前一阵拿去测GFC，结果却不让人满意（我同时还拿了一个分子量为6000左右的多肽去测，他们给我测出来是2万多）。想请教一下有什么好的办法能准确测定我的产品的分子量？（聚合物多肽的分子量不是单一的）。他们之所以给我测出两万多来是不是因为他们所使用的标准物质有问题？guoliangzeng@sina.com.cn qq:63409171 我在多肽纯化方面实在是个门外汉，现在逼鸭子上架，实在是没办法，希望有人能够在这方面多给点建议，上面是我的联系方式。 [ Last edited by glzeng on 2008-1-20 at 17:40 ] |
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glzeng
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reasonspare(金币+0,VIP+0):最好,说详细,然后重新开帖, 很少人会翻倒最后看问题.
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谢谢大家给我出的主意。 有些东西可能还是我说的不太清楚，让大家误解了。 我的这种聚合物是由A,B,C,D四种单体随机聚合而成，肽链中没有固定的肽序，肽链的长度也不是固定的，可以是ACBDACBAAD...., 也可以是ABDCAADABCA......等等。因此它是一个混合物，只有一个平均分子量的概念，不知道我这样说是否明白一点。 现在我采取方法就是用水溶性柱子，加上一个紫外检测器，测出一条曲线，然后再在同样的条件下测定几个具有一定分子量的标准物质，将它们的保留时间和分子量作一条标准曲线，再从中查出产品的平均分子量。这样的方法还是有问题，由于标准品的肽链结构及电荷分布与我的产品有一定的差别，因此得到的结果误差比较大（用一个分子量已知（分子量用质谱测定过），纯度为97％的多肽进行校正，其结果误差达到100％），我现在采取的解决办法是自己设定一定的肽序和肽链的长度（即分子量是一定的），通过固相的方法合成一些标准品，这样的话它们的性质应该与我的产品几乎是完全一致的。用质谱测出它们的准确分子量，然后再作它们的标准曲线，不知道这种方法能不能行得通？请大家指点一下 [ Last edited by glzeng on 2008-3-10 at 21:14 ] |
12楼2008-03-10 20:56:39
lxj341401
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