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glzeng

金虫 (小有名气)

[交流] 求助:多肽分子量的测定(报酬5金币)

各位大虾:
     小弟最近一直都在做一个聚合物多肽,分子量在5000-10000左右,当然由于是通过聚合得到,分子量也可能大于一万。产品我已经拿到了,但是对于它的测定确一直找不到好的方法。前一阵拿去测GFC,结果却不让人满意(我同时还拿了一个分子量为6000左右的多肽去测,他们给我测出来是2万多)。想请教一下有什么好的办法能准确测定我的产品的分子量?(聚合物多肽的分子量不是单一的)。他们之所以给我测出两万多来是不是因为他们所使用的标准物质有问题?guoliangzeng@sina.com.cn   qq:63409171
我在多肽纯化方面实在是个门外汉,现在逼鸭子上架,实在是没办法,希望有人能够在这方面多给点建议,上面是我的联系方式。

[ Last edited by glzeng on 2008-1-20 at 17:40 ]
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

Tricine SDS—PAGE,测定小分子蛋白或者多肽分子量和纯度常用的方法,具体步骤文献或者网上很容易找的。
2楼2008-01-20 19:10:52
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glzeng

金虫 (小有名气)

好像也搞不定哦

你说的这个方法这两天我也做过了,好像搞不定哦!
3楼2008-01-28 20:16:31
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johnsooh

荣誉版主 (正式写手)

此用户来自小木虫总部信号不好

Re

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):斑竹辛苦了,
楼主可以使用ESI或者MALDI-TOF质谱分析
通过打质谱可以获得各种分子量大小的Peptide的分子量,
简单易行,可信度高,效果和精度都比较好
___▂▂▃▄▅▆▇█无信号︻╋████�?
4楼2008-01-29 10:29:39
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andyzim

铜虫 (小有名气)

★
reasonspare(金币+1,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.
好像只有做质谱了……
5楼2008-01-29 16:47:30
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msn110

银虫 (小有名气)

我前阵子也拿了一个多肽去打质谱测分子量,结果没测出来,现在也正头疼呢,不知你做出来没?还请指教啊
6楼2008-01-30 14:11:05
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zq1979

木虫 (正式写手)

★
reasonspare(金币+1,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.
周小理   苦荞蛋白水解过程及其水解产物
抗氧化活性的初探   食品工业科技
你看一下这个文献,说不定对你有帮助!
7楼2008-01-31 17:03:11
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soniabee

铜虫 (初入文坛)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):xiexie,
如果你的这个是合成的比较纯的肽的话
这个用质谱做应该难度不大
我们实验室以前就做过
外面合成肽段的公司把他们合成好的肽拿过来让我们鉴定看是不是他们要的序列
如果只需要质量数,一级就可以了
如果还需要序列,就需要二级鉴定
8楼2008-02-03 09:52:17
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glzeng

金虫 (小有名气)

我可能没有说的太清楚,我做的产品是一个聚合物多肽,聚合物多肽和一般的多肽是不一样的,它没有一个确定的分子量,它的分子量是线性分布的,也就是说分子量只有一个范围,取一个平均分子量,用质谱测出来只会有一些象茅草一个峰,非常的杂,看不出来什么的。
9楼2008-02-19 20:08:57
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soniabee

铜虫 (初入文坛)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.
有点糊涂了
lz说的聚合物多肽指的是
1)那个肽的结构,序列是固定的,但是,可能是它的二聚,三聚。。。N聚体的形式
    假设肽的序列是ABC,质量数是M,测得的二聚体质量数是2M
2),由于合成肽段可能不纯,肽的序列可能不确定
  比如你要的序列是ABC,但是他们合成的可能是ABC,还有ABCC的混合物
是上面两个的哪种情况呀
10楼2008-02-22 13:38:39
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